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关于原代细胞提取外泌体?

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发表于 2016-8-17 16:28:53 | 只看该作者 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
我们课题组研究乳腺癌细胞的外泌体,近期老板想研究原代细胞的外泌体。原代细胞是从病人离体的组织分离出来的?想问有没有谁做过这个提取呢?
谢谢。
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沙发
发表于 2016-8-17 23:39:39 | 只看该作者
Our lab routinely collect exosomes/Evs from primary rat astrocytes. Using serum-free medium (SFM), incubating for 24 hours, and collecting by serial centrifugation/ultracentrifugation. But some people argued that it's better to use medium with EV-free serum rather than SFM.
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 楼主| 发表于 2016-8-18 19:32:57 | 只看该作者
Thank you very much. As what you respond, we consider that if we use SFM for primary cells, wthere the cells could survival? 24h or less? Later, I will try to compare SFM and EV-free serum.
Additionally, I want to collect the EVs through Life KIT, which did you think?
And, how much  cell supernatant with how many cells did you use for collecting?
Thanks again.
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