外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用

 找回密码
 立即注册
楼主: hzangs

用一百块钱的材料自己制作总价值十几万的SBI试剂盒!

[复制链接]

0

主题

3

帖子

18

积分

新手上路

Rank: 1

积分
18
发表于 2016-4-23 22:26:56 | 显示全部楼层
太嗨了。谢谢!
回复 支持 反对

使用道具 举报

2

主题

12

帖子

273

积分

中级会员

Rank: 3Rank: 3

积分
273
QQ
发表于 2016-4-26 23:04:15 | 显示全部楼层
确实改善好多
回复 支持 反对

使用道具 举报

0

主题

4

帖子

44

积分

新手上路

Rank: 1

积分
44
发表于 2016-4-28 09:40:40 | 显示全部楼层
领教了!
回复

使用道具 举报

0

主题

9

帖子

58

积分

注册会员

Rank: 2

积分
58
发表于 2016-5-3 19:20:44 | 显示全部楼层
楼主我试验了一下,可以看见沉淀,我完全按照帖子来的。有几个问题:
1、我采用先沉淀,后收集所有的exosome沉淀超离提纯。这个时候有个问题,PEG会导致上清中的蛋白质变性沉淀,变性的蛋白质会不会被一起超离下来?
2、如果一起被超离沉淀了,那么其实BCA的方法定量exosome量就不准确了。
所以很多文献中提到的使用沉淀法结合BCA定量其实我觉得很不准确,会把大量的蛋白当做exosome一起定量。
回复 支持 反对

使用道具 举报

300

主题

1259

帖子

6088

积分

超级版主

Rank: 8Rank: 8

积分
6088
 楼主| 发表于 2016-5-3 19:27:20 | 显示全部楼层
本帖最后由 hzangs 于 2016-5-3 19:28 编辑
lenoch 发表于 2016-5-3 19:20
楼主我试验了一下,可以看见沉淀,我完全按照帖子来的。有几个问题:
1、我采用先沉淀,后收集所有的exosom ...

个人感觉,这个方法只适用于缩小超离体积。 效果可能确实需要好好考察。
但是,这个方法降低了沉淀法分离exosome的成本,绝对是值得借鉴的。  毕竟,现在很多人使用SBI 或者 Life  ,那个价格太狠了。  而PEG完全可以代替,成本下降百倍……当然,想拿到比较纯的囊泡 还是使用其他的分离策略比较好。
回复 支持 反对

使用道具 举报

0

主题

17

帖子

74

积分

注册会员

Rank: 2

积分
74
发表于 2016-8-25 10:33:59 | 显示全部楼层
hzangs 发表于 2016-4-18 20:18
PEG6000 已预订。 应该会在明天入手

有没有使用?结果如何啊?
回复 支持 反对

使用道具 举报

300

主题

1259

帖子

6088

积分

超级版主

Rank: 8Rank: 8

积分
6088
 楼主| 发表于 2016-8-25 10:55:23 | 显示全部楼层
scar5488 发表于 2016-8-25 10:33
有没有使用?结果如何啊?

有的,在分离板块 有帖子
回复 支持 反对

使用道具 举报

0

主题

5

帖子

26

积分

新手上路

Rank: 1

积分
26
发表于 2016-9-2 10:47:25 | 显示全部楼层
回复

使用道具 举报

0

主题

47

帖子

387

积分

中级会员

Rank: 3Rank: 3

积分
387
发表于 2016-10-12 20:47:21 | 显示全部楼层
好厉害    重复性如何??
回复 支持 反对

使用道具 举报

300

主题

1259

帖子

6088

积分

超级版主

Rank: 8Rank: 8

积分
6088
 楼主| 发表于 2016-10-13 09:30:50 | 显示全部楼层
君扬2009 发表于 2016-10-12 20:47
好厉害    重复性如何??

挺好的。重复过两次。  我通常使用超速离心的
回复 支持 反对

使用道具 举报

您需要登录后才可以回帖 登录 | 立即注册

本版积分规则

关闭

站长推荐上一条 /1 下一条

QQ|Archiver|手机版|外泌体之家 | exosomes & microvesicles   

GMT+8, 2020-7-4 00:15 , Processed in 0.930220 second(s), 8 queries , File On.

Powered by Discuz! X3.3

© 2001-2017 Comsenz Inc.

快速回复 返回顶部 返回列表