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关于CD63

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发表于 2019-9-5 17:11:30 | 显示全部楼层 |阅读模式
想问问大伙,我用abcom的CD63,一抗大概稀释多少倍呢?上样量大概多少呢?用还原和非还原buffer影响大么?加buffer之后还煮蛋白么?已经做了3次了也没结果,很着急
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发表于 2019-9-5 17:14:29 | 显示全部楼层
根据抗体说明书操作即可。 另外 如果做不出来,要从需要从自己的外泌体分离方法上看看 找找原因。
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发表于 2019-9-5 17:22:58 | 显示全部楼层
以我们的经验。 WB检测不到的   绝大部分是因为外泌体样品里面 没有外泌体……
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 楼主| 发表于 2019-9-5 18:07:13 | 显示全部楼层
谢谢大神
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 楼主| 发表于 2019-9-5 18:15:03 | 显示全部楼层
可是可是,我用BCA测是有1ug/u丨浓度的呀,难到是留在管壁的血清被我重悬了?我用的是10.5ml的小管110000g2hx2次超离的,第一次超离吸剩离管底0.5Cm的样本再加PBS再离的
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 楼主| 发表于 2019-9-5 18:17:07 | 显示全部楼层
hzangs 发表于 2019-9-5 17:22
以我们的经验。 WB检测不到的   绝大部分是因为外泌体样品里面 没有外泌体…… ...

谢谢大神,可是可是,我用BCA测是有1ug/u丨浓度的呀,难到是留在管壁的血清被我重悬了?我用的是10.5ml的小管110000g2hx2次超离的,第一次超离吸剩离管底0.5Cm的样本再加PBS再离,
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发表于 2019-9-6 11:56:34 | 显示全部楼层
anlinyuan 发表于 2019-9-5 18:17
谢谢大神,可是可是,我用BCA测是有1ug/u丨浓度的呀,难到是留在管壁的血清被我重悬了?我用的是10. ...

蛋白定量  定的是蛋白, 只有你的样品比较纯的时候  蛋白定量才是有意义的。 不然就是废
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