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一种在极少量尿液中分离并分析细胞外囊泡的新方法

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发表于 2019-8-14 21:43:35 | 显示全部楼层 |阅读模式
西班牙科学家开发了一种在极少量尿液中分离并分析细胞外囊泡的新方法
近日,来自西班牙高级科学研究委员会(CSIC)的研究团队开发了一种分析纳米囊泡的新方法,这种纳米囊泡也称为细胞外囊泡(属于细胞释放的小颗粒,在体液中可被发现和检测)。这项研究发表在Scientific Reports杂志上,该方法可直接从尿液样本中获取这些微小的细胞外囊泡的信息并分析它们的成分。开发基于细胞外囊泡的检测,最终可以转移到临床实践中并且具有非侵入性操作的优点。

近年来,已经观察到所有体细胞都可以产生这些囊泡并且在生物体液中被检测,例如血液和尿液。“这种方法的重点步骤是分析细胞外囊泡,这些囊泡在生物体不同组织细胞之间参与物质交流和运输,发挥了重要作用。细胞外囊泡研究被认为是诊断和验证新型生物标记物的关键。” 该研究的通许作者Mar Valés研究员解释道。

“因此,该技术的发展为寻找液体活检中的新靶点开辟了道路,最终用于用于诊断、预后或患者疗效监测,为每位患者更好地选择合适的治疗方案。在医院使用相同的设备进行血液检测,我们的努力旨在使实惠的个性化医疗成为现实。” Mar Valés博士说。

“在这项研究里,通过这种新方法,我们用非常少量的体液来表征纳米囊泡,无需特殊处理,提高了工艺效率和检测灵敏度。” Mar Valés博士补充道。

到目前为止,确定纳米囊泡中组分特性的方法一般非常耗时,需要专门的研究设备(如超速离心机)和科研人员,并且需要消耗大量样本。此外,在分析样本之前需要复杂的处理,并且在许多情况下,不容易同时分离样本中的相近颗粒大小的杂质。

在这项研究里,Mar Valés等人描述的新方法将纳米囊泡与其余组分分离,能够实现比现有技术要求的低十倍以上的尿液体积中获取信息。

图:通过免疫捕获分离以及流式细胞优化分析细胞外囊泡的示意图。(A)每个珠子固定的EV数量的理论计算。该图显示了实际尺度为6μm直径的珠子和直径为150nm的小囊泡。N表示珠子的外表面可以捕获150nm 囊泡数量的最大值。(B)珠子结合测定分析的示意图。抗体包被的6μm直径荧光磁珠用于细胞外囊泡的免疫捕获。使用相同或不同分子的二抗(生物素或PE缀合)用于检测。生物素修饰的抗体标记后,使用PE-缀合的链亲和素抗生物素蛋白进行结合,最后通过常规流式细胞术分析样品。

关于细胞外囊泡

细胞外囊泡的组成随着不同的病理情况变化而变化,来自健康细胞的囊泡与经历过一些病理变化的(例如感染或肿瘤)囊泡中的内含物及表征会有不同。细胞外囊泡的这些特征使它们被认为是用于诊断疾病的工具,并且许多研究人员将细胞外囊泡纳入在液体活检范畴中,这种近年来在临床中引入以替代手术活组织检查的非侵入性检测方式正在兴起中。通过这种方式,通过简单的血液或尿液测试便可以获得关于肿瘤等其他疾病的信息。目前,对于细胞外囊泡研究面临的挑战是在不同实验室和医院里缺少标准的定性和分析体系。

参考文献:
  • Campos-Silva C, Suárez H, Jara-Acevedo R, Linares-Espinós E, Martinez-Piñeiro L, Yáñez-Mó M, Valés-Gómez M. (2019) High sensitivity detection of extracellular vesicles immune-captured from urine by conventional flow cytometry. Sci Rep 9(1):2042.
  • https://www.cnb.csic.es/index.php/en/science-society/news/item/1560-un-nuevo-metodo-es-capaz-de-detectar-nanovesiculas-en-cantidades-minimas-de-orina

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