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请教大家超离第一次后是否会用PBS洗涤外泌体,如何洗涤

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发表于 2018-11-13 21:05:08 | 显示全部楼层 |阅读模式
RT。
有人建议先用大的超离管离,再用小超离管加大离心力,浓缩。


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发表于 2018-11-13 21:27:43 | 显示全部楼层
加PBS  加满超离管。 然后再超离一次。  然后弃PBS  底部留一点  重悬外泌体
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 楼主| 发表于 2018-11-14 20:58:34 | 显示全部楼层
hzangs 发表于 2018-11-13 21:27
加PBS  加满超离管。 然后再超离一次。  然后弃PBS  底部留一点  重悬外泌体

有前辈的建议是,第二次用PBS洗涤的时候应该转移到更小的离心管,加大离心力并且延长离心时间,这样能起到浓缩的作用,不知道您的观点如何?
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 楼主| 发表于 2018-11-14 20:59:48 | 显示全部楼层
hzangs 发表于 2018-11-13 21:27
加PBS  加满超离管。 然后再超离一次。  然后弃PBS  底部留一点  重悬外泌体

弃PBS是用倒的还是用吸的呢
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发表于 2018-11-15 11:46:15 | 显示全部楼层
爱学习 发表于 2018-11-14 20:59
弃PBS是用倒的还是用吸的呢

吸。
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发表于 2018-11-15 11:46:35 | 显示全部楼层
爱学习 发表于 2018-11-14 20:58
有前辈的建议是,第二次用PBS洗涤的时候应该转移到更小的离心管,加大离心力并且延长离心时间,这样能起 ...

最好要缩小体积
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 楼主| 发表于 2018-11-18 19:34:43 | 显示全部楼层

发现一个很震惊的结果,PBS洗之前的重悬的东西,BCA测浓度稀释了五倍还是超过上限500ug/ul,但是PBS洗了之后重悬,测出来浓度不到50ug/ul.所以那么高的浓度,其实都是蛋白杂质喽?
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发表于 2019-3-6 10:41:40 | 显示全部楼层
hzangs 发表于 2018-11-13 21:27
加PBS  加满超离管。 然后再超离一次。  然后弃PBS  底部留一点  重悬外泌体

您好,请问再一次超离的离心力和时间是多少?
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发表于 2019-3-6 17:42:38 | 显示全部楼层
爱学习 发表于 2018-11-18 19:34
发现一个很震惊的结果,PBS洗之前的重悬的东西,BCA测浓度稀释了五倍还是超过上限500ug/ul,但是PBS洗了 ...

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发表于 2019-3-6 17:42:54 | 显示全部楼层
小柠檬 发表于 2019-3-6 10:41
您好,请问再一次超离的离心力和时间是多少?

110000g  70min
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