外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用

 找回密码
 立即注册
楼主: Johnny

想统计下大家用超速离心时一次用多少量的细胞上清才够用

  [复制链接]
回帖奖励 100 金钱 回复本帖可获得 10 金钱奖励! 每人限 1 次

1

主题

11

帖子

127

积分

注册会员

Rank: 2

积分
127
发表于 2018-12-28 16:20:17 | 显示全部楼层

回帖奖励 +10 金钱

没用两个T75板的上清,
回复

使用道具 举报

3

主题

10

帖子

130

积分

注册会员

Rank: 2

积分
130
发表于 2019-1-14 09:16:04 | 显示全部楼层

回帖奖励 +10 金钱

本人刚开始做外泌体,请教一下楼里的大神们,我的细胞已经在6孔板里长了五天,第三天的时候密度已经90%了,还能处理后收集细胞上清液吗?会不会细胞老化了,分泌外泌体就少了啊
回复

使用道具 举报

0

主题

15

帖子

74

积分

注册会员

Rank: 2

积分
74
发表于 2019-3-18 09:42:53 | 显示全部楼层

回帖奖励 +10 金钱

teddy溶溶 发表于 2018-10-25 15:15
看了好多人反应包括测序公司都说细胞上清提取出的exo量少的可怜,我这次决定用20以上个培养皿收集。请问大 ...

使用NTA测量粒子大小,我们就是这么做的。测量出来的粒子体积在50nm-200nm之间,峰值为100nm,90百分位数的时候体积是132,基本都是在外泌体那个体积之内。
回复

使用道具 举报

0

主题

23

帖子

107

积分

注册会员

Rank: 2

积分
107
发表于 2019-3-27 10:10:44 | 显示全部楼层

回帖奖励 +10 金钱

我是用的超滤管浓缩后再用试剂提取的,有人用过吗?效果如何
回复

使用道具 举报

0

主题

23

帖子

107

积分

注册会员

Rank: 2

积分
107
发表于 2019-3-27 12:10:53 | 显示全部楼层
bobo 发表于 2015-5-26 10:25
我想用试剂盒提exosome,那么如何将100ml的细胞培养液浓缩到4ml,从而使培养液中的exosome浓度大些 ...

你做的效果怎么样
回复

使用道具 举报

0

主题

23

帖子

107

积分

注册会员

Rank: 2

积分
107
发表于 2019-3-27 12:21:34 | 显示全部楼层
wwpapple 发表于 2018-8-14 11:28
想请教一下,因为实验室没有超高速离心机,用试剂盒提取外泌体的话,提取的量够后续转染或者共培养实验吗? ...

请问你之后是怎么解决的?
回复

使用道具 举报

0

主题

5

帖子

46

积分

新手上路

Rank: 1

积分
46
发表于 2019-4-18 19:19:09 | 显示全部楼层

回帖奖励 +10 金钱

T75的培养瓶  四瓶
回复

使用道具 举报

0

主题

6

帖子

44

积分

新手上路

Rank: 1

积分
44
发表于 2019-5-9 19:27:28 | 显示全部楼层

回帖奖励 +10 金钱

luckkit 发表于 2015-4-21 13:35
偶觉得还少了两个参数,细胞类型和数量

请问您的经验需要多少数量的细胞提取外泌体?我试过20*10^6细胞(2个10cm dish),一次跑不出外泌体mark,但是有一次跑出来一个Alix的条带
回复

使用道具 举报

1

主题

23

帖子

160

积分

注册会员

Rank: 2

积分
160
发表于 2019-8-22 08:48:40 | 显示全部楼层

回帖奖励 +10 金钱

木瓜31 发表于 2015-5-7 21:37
那一般多少量细胞上清超离够做电镜鉴定呢?

看细胞以及细胞密度吧,电镜我用过30ml上清
回复

使用道具 举报

2

主题

30

帖子

169

积分

注册会员

Rank: 2

积分
169
发表于 2019-8-22 09:33:04 | 显示全部楼层

回帖奖励 +10 金钱

暮色恭喜发财 发表于 2015-8-18 10:39
请教一下,0.22um过滤的目的是什么?

除掉大于220nm的颗粒
回复

使用道具 举报

您需要登录后才可以回帖 登录 | 立即注册

本版积分规则

关闭

站长推荐上一条 /1 下一条

QQ|Archiver|手机版|外泌体之家 | exosomes & microvesicles   

GMT+8, 2019-10-19 11:16 , Processed in 0.147592 second(s), 11 queries , File On.

Powered by Discuz! X3.3

© 2001-2017 Comsenz Inc.

快速回复 返回顶部 返回列表