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楼主: muzi.csu
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外泌体电镜鉴定

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发表于 2015-2-4 11:05:09 | 显示全部楼层 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
感觉电镜结果怪怪的,我看好多人的电镜图都是单个的,但是我的怎么是好几个在一个囊泡里面一样的,这个是外泌体么...

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 楼主| 发表于 2015-2-4 16:51:52 | 显示全部楼层
Johnny 发表于 2015-2-4 12:14
没有标尺。。。可能是exo聚集成团了吧

我只截了一部分,回复里面不知道再怎么放图片了....不过上面那个图是500nm的标尺...成团会不会跟我送去做电镜的样本有关呢,我是在EP管里直接固定exosome的沉淀送去电镜室的
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 楼主| 发表于 2015-2-4 16:54:27 | 显示全部楼层
lwj7853 发表于 2015-2-4 12:44
TEM还是SEM?感觉真像聚团了,大小正确吗?

是做的透射电镜,大小的话觉得比较小额...感觉<50nm的比较多
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 楼主| 发表于 2015-2-5 14:19:52 | 显示全部楼层
liuzhen200892 发表于 2015-2-5 11:00
请问,做外泌体电镜,应该怎么准备材料?因为是要到年后才能排上,我想把样本先送到电镜室,但是那边没有-8 ...

我们这边是电镜室给的固定液,提出来外泌体之后,直接用固定液固定沉淀,放在4°冰箱,排队等着,好像固定后能够放挺久的,然后还有的是直接送PBS悬液过去,不过这个我不是很清楚了
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 楼主| 发表于 2015-2-5 14:22:07 | 显示全部楼层
Johnny 发表于 2015-2-4 20:17
<50nm是略小了点。要判定的话,结合WB、nanosight吧

恩啊.......
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 楼主| 发表于 2015-2-9 10:29:23 | 显示全部楼层
liuzhen200892 发表于 2015-2-7 15:26
直接用戊二醛固定液固定吗?我现在的是已经解冻了,暂时做不了。我直接再冻住没关系吧? ...

(⊙o⊙)…这个我不是很清楚额
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 楼主| 发表于 2015-4-27 12:46:41 | 显示全部楼层
我是用SBI的试剂盒分离的外泌体,没做什么处理,就是分离后把固定液直接加到管子里了。
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 楼主| 发表于 2016-7-6 20:37:56 | 显示全部楼层
wanghx_85 发表于 2015-10-22 23:34
我做的电镜图片和你的差不多,不过稍微好点儿,能看到单个囊泡,这应该是成团了,再提醒你一句保护好你的图 ...

好久没登了,谢谢
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 楼主| 发表于 2016-7-6 20:38:32 | 显示全部楼层
w403185742 发表于 2015-12-17 16:57
你好,我是初做外泌体的菜鸟,我也遇到了外泌体抱团的情况,请问这个问题你解决了吗? ...

没有解决  后来
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 楼主| 发表于 2016-7-6 20:39:59 | 显示全部楼层
子非鱼 发表于 2016-5-19 15:30
你好!我也是用SBI试剂盒提取外泌体(血清和细胞的都有),做了两次TEM,聚焦不清楚,电镜老师说我制样的 ...

我的挺多外泌体的,肉眼可见沉淀,沉淀直接固定液固定的,我做的是细胞上清的(⊙o⊙)…
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