外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用

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楼主: pytruth
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感觉电镜做废了

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发表于 2016-7-16 20:00:07 | 只看该作者
pytruth 发表于 2016-7-15 17:28
还有就是,之前看论坛里有提到用粒子数/蛋白量来比较两组细胞分泌的外泌体多少,这个方法您觉得怎么样?
...

粒子数/蛋白量只能反映出样品中 杂蛋白的多少。 这个值也大 说明系统中粒子数目越高。 这个值并不严谨。但是如果可以结合NTA或者流式荧光标记囊泡再检测数目  这个比值的意义可能会更好一些。
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 楼主| 发表于 2016-7-18 09:36:27 | 只看该作者
hzangs 发表于 2016-7-16 20:00
粒子数/蛋白量只能反映出样品中 杂蛋白的多少。 这个值也大 说明系统中粒子数目越高。 这个值并不严谨。 ...

好的,谢谢!还请问一下,能把您细胞上清超速离心提取外泌体的操作流程提供一下参考一下吗?
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发表于 2016-7-18 09:55:32 | 只看该作者
pytruth 发表于 2016-7-18 09:36
好的,谢谢!还请问一下,能把您细胞上清超速离心提取外泌体的操作流程提供一下参考一下吗? ...

你可以参考  2006年thery 发表的那篇protocol   就是按照那个来的
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发表于 2016-7-18 17:49:45 | 只看该作者
感谢分享!
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 楼主| 发表于 2016-7-20 10:47:50 | 只看该作者
hzangs 发表于 2016-7-18 09:55
你可以参考  2006年thery 发表的那篇protocol   就是按照那个来的

好的,谢谢!
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发表于 2017-9-12 09:50:11 | 只看该作者
我之前也做过两次铜网破裂,后来稀释了大概三四十倍,就可以了
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发表于 2017-9-12 18:10:44 | 只看该作者
我提的是血浆的外泌体,也发生同样的事,杂蛋白太多,膜破了。不知道也没有办法先去除高丰度的蛋白质,再提外泌体会不会好一点。
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发表于 2017-9-12 21:12:06 | 只看该作者
..........................
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发表于 2017-9-19 10:06:41 | 只看该作者
铜网上的膜也破了,我的超离血清得到的,等体积重悬了沉淀,10微升滴铜网,发现电镜下也破了,老师建议我稀释
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