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楼主: huan1989111007
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求助,从exosome提出RNA后的qPCR.

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发表于 2015-1-2 14:44:19 | 显示全部楼层
你是做miRNA吧?我用天根的逆转录kit,跑出来循环数较高,25-30个吧。扩增曲线蛮好的~据另一个战友讲,QIANGEN的更好一点,进口的,贵。。。
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沙发
发表于 2015-1-7 10:20:01 | 显示全部楼层
muyujun123 发表于 2015-1-5 19:47
能不能交流一下?你做exosome的mirna定量pcr所用的外参是什么?有用cel-mir-39的,这个是要在提取rna的时 ...

外参?不知道还需要这个东西啊。。。我只用了内参
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发表于 2015-1-9 09:22:37 | 显示全部楼层
muyujun123 发表于 2015-1-8 20:03
内参?用的u6吗?但是我看文献里说,exosome里面的mirna是要用外参的啊,exosome里有u6吗? ...

你有相关文献么?可以贴出来分享一下~我对这方面内容目前了解的不多,就以U6作为内参的,是可以跑出来的。设置外参的目的是什么呢?
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发表于 2015-9-7 10:06:15 | 显示全部楼层
kadak007 发表于 2015-9-7 09:53
惜名版主,你有没有用过天根的miRNA荧光定量检测试剂盒?想请教下 上游引物设计问题...... ...

用过  但是效果并不好。。。
引物是公司帮忙设计的   我没设计过引物
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发表于 2015-9-7 10:06:21 | 显示全部楼层
kadak007 发表于 2015-9-7 09:53
惜名版主,你有没有用过天根的miRNA荧光定量检测试剂盒?想请教下 上游引物设计问题...... ...

用过  但是效果并不好。。。
引物是公司帮忙设计的   我没设计过引物
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发表于 2016-9-3 16:06:12 | 显示全部楼层
旋转的尾音 发表于 2016-9-1 19:55
惜名你好~~~想请教引物是哪个公司帮我设计的,求推荐~~~

我找的biotnt,这家公司在上海貌似做了挺久的,我在他们那里做过好几次,感觉还行,哈哈
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