求助，从exosome提出RNA后的qPCR.

muyujun123

惜名 发表于 2015-1-2 14:44
你是做miRNA吧？我用天根的逆转录kit，跑出来循环数较高，25-30个吧。扩增曲线蛮好的~据另一个战友讲，QIAN ...

能不能交流一下？你做exosome的mirna定量pcr所用的外参是什么？有用cel-mir-39的，这个是要在提取rna的时候另外加进去吗还是？

muyujun123

惜名 发表于 2015-1-7 10:20
外参？不知道还需要这个东西啊。。。我只用了内参

内参？用的u6吗？但是我看文献里说，exosome里面的mirna是要用外参的啊，exosome里有u6吗？

muyujun123

惜名 发表于 2015-1-9 09:22
你有相关文献么？可以贴出来分享一下~我对这方面内容目前了解的不多，就以U6作为内参的，是可以跑出来的 ...

因为exosome中u6的含量不太稳定，所以一般人为的加入外参来定量。我也不是很清楚，正在摸索。我觉得可能是加入标准品进行绝对定量吧