求助，从exosome提出RNA后的qPCR.

limitzy

学习了，谢谢

kadak007

惜名 发表于 2015-1-2 14:44
你是做miRNA吧？我用天根的逆转录kit，跑出来循环数较高，25-30个吧。扩增曲线蛮好的~据另一个战友讲，QIAN ...

惜名版主，你有没有用过天根的miRNA荧光定量检测试剂盒？想请教下 上游引物设计问题......

惜名

kadak007 发表于 2015-9-7 09:53
惜名版主，你有没有用过天根的miRNA荧光定量检测试剂盒？想请教下 上游引物设计问题...... ...

用过  但是效果并不好。。。
引物是公司帮忙设计的   我没设计过引物

惜名

kadak007 发表于 2015-9-7 09:53
惜名版主，你有没有用过天根的miRNA荧光定量检测试剂盒？想请教下 上游引物设计问题...... ...

用过  但是效果并不好。。。
引物是公司帮忙设计的   我没设计过引物

kadak007

惜名 发表于 2015-9-7 10:06
用过  但是效果并不好。。。
引物是公司帮忙设计的   我没设计过引物

唉，感觉内心很忐忑呀，先硬着头皮试试吧

huan1989111007

惜名 发表于 2015-9-7 10:06
用过  但是效果并不好。。。
引物是公司帮忙设计的   我没设计过引物

不好是怎样的？这方面太坑...

huan1989111007

kadak007 发表于 2015-9-7 10:11
唉，感觉内心很忐忑呀，先硬着头皮试试吧

最主要的是提取exosome的量，其次是逆转录的试剂盒。祝好运...

huan1989111007

kadak007 发表于 2015-9-7 10:11
唉，感觉内心很忐忑呀，先硬着头皮试试吧

最主要的是提取exosome的量，其次是逆转录的试剂盒。祝好运...

huan1989111007

kadak007 发表于 2015-9-7 09:53
惜名版主，你有没有用过天根的miRNA荧光定量检测试剂盒？想请教下 上游引物设计问题...... ...

miRNA 一般有通用引物和特异性引物的。通用引物一般试剂盒中有，特异性引物自己购买即可。差别不大。

kadak007

huan1989111007 发表于 2015-9-7 21:50
miRNA 一般有通用引物和特异性引物的。通用引物一般试剂盒中有，特异性引物自己购买即可。差别不大。 ...

谢谢啊，准备近期试试，希望有结果...