求助，从exosome提出RNA后的qPCR.

huan1989111007 · 发表于 2015-9-7 21:47:28

kadak007 发表于 2015-9-7 10:11
唉，感觉内心很忐忑呀，先硬着头皮试试吧

最主要的是提取exosome的量，其次是逆转录的试剂盒。祝好运...

huan1989111007 · 发表于 2015-9-7 21:46:20

惜名发表于 2015-9-7 10:06
用过但是效果并不好。。。
引物是公司帮忙设计的我没设计过引物

不好是怎样的？这方面太坑...

kadak007 · 发表于 2015-9-7 10:11:20

惜名发表于 2015-9-7 10:06
用过但是效果并不好。。。
引物是公司帮忙设计的我没设计过引物

唉，感觉内心很忐忑呀，先硬着头皮试试吧

惜名 · 发表于 2015-9-7 10:06:21

kadak007 发表于 2015-9-7 09:53
惜名版主，你有没有用过天根的miRNA荧光定量检测试剂盒？想请教下上游引物设计问题...... ...

用过但是效果并不好。。。
引物是公司帮忙设计的我没设计过引物

惜名 · 发表于 2015-9-7 10:06:15

kadak007 发表于 2015-9-7 09:53
惜名版主，你有没有用过天根的miRNA荧光定量检测试剂盒？想请教下上游引物设计问题...... ...

用过但是效果并不好。。。
引物是公司帮忙设计的我没设计过引物

kadak007 · 发表于 2015-9-7 09:53:27

惜名发表于 2015-1-2 14:44
你是做miRNA吧？我用天根的逆转录kit，跑出来循环数较高，25-30个吧。扩增曲线蛮好的~据另一个战友讲，QIAN ...

惜名版主，你有没有用过天根的miRNA荧光定量检测试剂盒？想请教下上游引物设计问题......

limitzy · 发表于 2015-6-18 14:24:18

学习了，谢谢

wanghx_85 · 发表于 2015-6-12 08:55:21

这是我昨天收到的技术支持发给我的文件，关于SBI研究外泌体miR的一些相关设计，感兴趣的可以看一下，我还没来得及看

，有兴趣大家一起交流下~

wanghx_85 · 发表于 2015-6-12 08:52:13

惜名发表于 2015-1-9 09:22
你有相关文献么？可以贴出来分享一下~我对这方面内容目前了解的不多，就以U6作为内参的，是可以跑出来的 ...

我问过相关的技术支持，现在做exo的miR没有公认的内参（也就是说U6是不行滴），设置外参的目的是为了说明不同组别之间的差异并不是由于你操作问题导致的，比如上样量不一样，或是标本污染，我也没有特别搞懂，目前正在研究中，如果你有新进展，希望我们一起探讨~

wenzhouzsl · 发表于 2015-5-30 21:19:11

您好，我想问问您现在用的什么基因作为参照？内参or 外参？效果如何？

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