外泌体RNA提取

wjy

hzangs 发表于 2016-4-5 18:17
后边的  65.6ng 比值1.48  和我之前抽提到的应该比较类似。

是的  5min

求问，求帮助，新手用TRIZOL提的外泌体总RNA也是这种情况，浓度比你好低，吸光度值1.48，根据吸光度值来看是不是蛋白和酚类污染啊？怎么解决啊？浓度还低。我的提的RNA想做二代测序，这种样品质量估计不行啊。

wjy

hzangs 发表于 2016-7-24 17:15
这个好像没什么好办法。  能做的就是加大外泌体的起始量  然后可以提高最后抽提出的RNA的量  质量可能也 ...

恩恩 ，我是刚开始做提RNA ,量是有点小，想先摸摸条件试一试。那污染那？看吸光度1.48不是蛋白污染吗？换成试剂盒提取效果会好吗？

wjy

hzangs 发表于 2016-7-25 09:41
http://www.exosome.com.cn/forum.php?mod=viewthread&tid=886&page=11#pid7725  你可以看看这个贴子里的 ...

恩恩好的谢谢你的帮助。

wjy

hzangs 发表于 2016-7-25 09:41
http://www.exosome.com.cn/forum.php?mod=viewthread&tid=886&page=11#pid7725  你可以看看这个贴子里的 ...

想像你你咨询一下，你外泌体提取的RNA有跑RNA电泳吗？有18s和28s的条带吗？我和细胞同时提取的总RNA,细胞内有18s和28s的核糖体RNA ,外泌体中啥条带都没有。

wjy

大家提取的外泌体总RNA 有跑过RNA电泳吗？第一条是DNAmarker(原谅没有RNAmarker),第二条是外泌体RNA(啥也没有，),第三条是细胞的RNA有18s和28s，大家跑都这样吗

wjy

恩恩，对，外泌体是没有rRNA,跑电泳没有的原因是RNA量太低了是吗？检测不到是吗？那怎么检测那？那细胞组从电泳上看应该是18S和28s吗？

wjy

hzangs 发表于 2016-7-29 17:24
外泌体中是不会有18s 和28s的条带的。   RNA电泳是检测RNA灵敏度非常低的手段。你提取出的那点外泌体RNA  ...

恩，对，外泌体是没有rRNA,跑电泳没有的原因是RNA量太低了是吗？检测不到是吗？那怎么检测那？那细胞组从电泳上看应该是18S和28s吗？你的外泌体提取的总RNA,怎么检测那？