外泌体RNA提取

旋转的尾音 · 发表于 2016-4-1 17:04:36

hzangs 发表于 2016-3-21 12:20
trizol 或者随便用一个微量RNA提取试剂盒
我是用trizol的

你好，请问50微升的PBS里，一般用多少trizol？

旋转的尾音 · 发表于 2016-4-1 17:05:19

woshiyywlly 发表于 2016-3-22 14:18
trizol和trizol LS都可以，大概100ug exosome能提出0.5-1.5 ug 的RNA（从细胞上清中提取的exosome，RNA含量 ...

你好，请问50微升的PBS里，一般用多少trizol？

旋转的尾音 · 发表于 2016-4-5 10:45:23

hzangs 发表于 2016-4-1 19:33
1ml trizol就可以。但是体系含水量高，你需要在加入异丙醇后再加入10%体积的3M醋酸钠去调一下体系盐离 ...

感谢回复，请问是否有文献给我学习一下。之前提了一次，一个样本含量很低，另一个纯度不高，所以还在摸索阶段。

旋转的尾音 · 发表于 2016-4-5 14:22:14

hzangs 发表于 2016-4-5 10:50
这方面的文献没读过。都是以前抽RNA的经验。 qiagen抽提膜泡内RNA的kit 我一个朋友使用过了，出来的量 ...

太感谢了，这个信息对我太有帮助了，谢谢分享~~~我之前尝试性提了两个，一个2.3ng/ul，比值1.97；一个65.6ng，比值1.48。正苦恼为什么比值这个样子。谢谢~

旋转的尾音 · 发表于 2016-4-5 15:56:55

hzangs 发表于 2016-4-5 10:50
这方面的文献没读过。都是以前抽RNA的经验。 qiagen抽提膜泡内RNA的kit 我一个朋友使用过了，出来的量 ...

请问你这边的经验就是1ml TRIzol，然后室温放置多久？常规5min？谢谢。

旋转的尾音 · 发表于 2016-4-5 22:33:17

hzangs 发表于 2016-4-5 18:17
后边的 65.6ng 比值1.48 和我之前抽提到的应该比较类似。

是的 5min

明白了，谢谢分享

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