讨论：血清外泌体提取后杂marker条带-背景高

hzangs

子非鱼 发表于 2016-1-14 11:25
另外，红线划到的地方为目的条带

看着挺不错的结果~~
有一个问题~
有没有看一下， 单杂血清  或者去掉exosome的血清  有没有这些条带？
血清成分很复杂，可能有些exosome表面marker在血清里有游离存在的。

hzangs

子非鱼 发表于 2016-1-14 12:39
斑竹，还没看呢，之前看到帖子说血清蛋白复杂，westernt不好做，我就先没做，而且只上exosome，都这 ...

我也想看看   去掉 exosomes的血清里  会不会有这些游离的marker   谢谢你啦~

hzangs

子非鱼 发表于 2016-1-16 11:49
提取exosome后的血清，查网上帖子血清浓度太高，约有说60-80μg的蛋白浓度，需稀释至少10倍再上样，此处 ...

谢谢~
这么看  确实有些marker蛋白可能在血清中游离。  不过exosome样品还是会富集的。  谢谢你的数据~~

hzangs

子非鱼 发表于 2016-1-16 11:49
提取exosome后的血清，查网上帖子血清浓度太高，约有说60-80μg的蛋白浓度，需稀释至少10倍再上样，此处 ...

也就是说   你exosome样品和 去除exosome的serum 上样的蛋白量是一致的？

hzangs

子非鱼 发表于 2016-1-18 15:57
已鉴定，总蛋白浓度，血清浓度70μg/μl，对应外泌体浓度是17μg/μl，约4倍的关系。 ...

谢谢你的数据 ~~   这样就解决了一个很大的问题呢