大家关于试剂盒的几点疑问和澄清

Izon

也比较赞同这篇文章中提出的 “粒子浓度/微克蛋白”表示exosome浓度的方法 "Optimized exosome isolation protocol for cell culture supernatant and human plasma" 【http://www.journalofextracellula ... /article/view/27031】，这种结果更真实准确的反应了exosome在样品中的含量。

其实exosome的准确定量不单对区分各种分离方法的优劣有意义，对今后不管在diagnostic还是 therapy的应用领域都是很重要的数据。国外在定量方面的研究和应用已近开展了好几年了，国内也有课题组开始重视这个问题，并开始这方面的研究，比如说在therapy中比较不同量的exosome是否产生不同的效果，以及最佳的效果量等。

Izon

seallin 发表于 2015-10-28 10:17
有点疑问，文献他们用的仪器是TRPS（qnano的），测量粒径的时候单位是1E11 particles/mL，这太高了吧，我 ...

你的这个数据是颗粒浓度，不是粒径吧。

关于颗粒浓度，手上正好有几张图，大家可以比较一下：


所以纳米颗粒的浓度，只是测试参数不同，结果就不同啦

Izon

seallin 发表于 2015-10-28 15:44
测试参数的不同，确实会有所差别，不过貌似不会有数量级上的差别吧

结果都是用100nm+200nm标准样品1：1配好来测的。应该了解一下这个“浓度”是怎么“测”出来的，跟什么有关系，这样就不难理解为什么有数量级的差别啦。
其实好多人都frustrate这个问题了

Izon

seallin 发表于 2015-10-28 16:14
我知道，和斯托克斯方程有关，系数不一样，最后的浓度就不一样啦

还有光源，photo detector, 颗粒对光的scattering，大颗粒的影响，溶液离子强度等。反正要是测量结果有什么不同，不一定是你的样品本身不同。不过要是不在意准确性和重现性，或者有人说有数据总比没有强的话，Ok啦。

Izon

seallin 发表于 2015-10-28 16:45
和文献对比可能会出现参数不同的问题，但是不至于差好几个数量级。但是自己的横向对比因为参数一致，所以 ...

有机会的话，你稀释一个浓度梯度测测看，看能不能给你一个意外的结果。

不过目前国内关注外泌体准确定量的还不多，但是大家都奔着application去的，不管是diagnostic还是therapy, 以后标准化，准确，重现性好的定量方法肯定是要有的。

Izon

seallin 发表于 2015-10-29 14:59
算了，到此为止，我

颗粒浓度/蛋白的方法是比较客观，但需要把颗粒浓度测得很准确。如果愿意的话可以联系：ian.yan@izon.com或ianyan@outlook.com。或许可以就粒子浓度的测量帮上忙。

Izon

dw0720 发表于 2016-2-17 23:01
看完后觉得学习好多啊，大家都不更新了吗？我也在做exosomes提取，纠结于怎么评价提取效果，仅仅根据粒径分 ...

第二页11#就有这篇文章的链接：“也比较赞同这篇文章中提出的 “粒子浓度/微克蛋白”表示exosome浓度的方法 "Optimized exosome isolation protocol for cell culture supernatant and human plasma" 【http://www.journalofextracellula ... /article/view/27031】，这种结果更真实准确的反应了exosome在样品中的含量”

有关分离定量的帖子：
http://www.exosome.com.cn/forum. ... ;tid=210&extra=
http://www.exosome.com.cn/forum. ... ;tid=179&extra=