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DiR外泌体体内示踪

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发表于 2019-7-2 10:38:22 | 显示全部楼层 |阅读模式
请教:我想看肿瘤细胞外泌体体内的器官摄取定位,超速离心提取外泌体,取40ug外泌体用PE的DiR标记半个小时,然后用invitrogen的MW3000外泌体过滤柱洗涤(宋尔卫教授文章xtracellular vesicle-packaged HIF-1α-stabilizing lncRNA from tumour-associated macrophages regulates aerobic glycolysis of breast cancer cells用过),然后小鼠尾静脉注射,12h后用布鲁克拍摄ex-vivo照片,如图:是不是能说明外泌体都聚集在肝脏,不在肺?还是说有可能是在肝脏里边代谢了?

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发表于 2019-7-2 20:00:03 | 显示全部楼层
仅有这一个实验   你说的哪两种可能 都存在。  但看你自己想怎么解释了。
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发表于 2019-7-2 21:25:42 | 显示全部楼层
时间点也很重要吧。
比如尾静脉注射后1小时取样,结果肯定和12小时后取样不同。
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 楼主| 发表于 2019-7-2 22:55:50 | 显示全部楼层
谢谢两位的意见!我看文献多的是尾静脉注射后12h跟24h拍荧光
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发表于 2020-2-28 13:47:04 | 显示全部楼层
请教:你好,请问您是直接把DIR标记的外泌体经尾静脉注射12h之后拍的荧光吗?还有没有其他的处理?因为我们也这样做过一次,用的活着的小鼠(没有把器官取出来拍),但是老师说小鼠本底荧光比较强,看不出来exosome的荧光,我们是注射完2h去拍的,也有可能是因为还没有完全和细胞膜结果导致信号不强。您有没有好的建议,谢谢!
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发表于 2020-2-28 14:28:09 | 显示全部楼层
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发表于 2020-3-2 21:06:53 | 显示全部楼层
cuifeng1127 发表于 2020-2-28 14:28
https://mp.weixin.qq.com/s?__biz=MzIyNjQ2Mjc5Ng==&mid=2247484422&idx=1&sn=121e4106f59d64dc83fe41d2cb ...

看了好多文献都说是微克级别的外泌体注射,请问200ug外泌体是用什么来量化的呢,是以外泌体内的蛋白含量为标准吗?请大家赐教!!!
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发表于 2021-12-2 20:02:55 | 显示全部楼层
cui_0029 发表于 2020-3-2 21:06
看了好多文献都说是微克级别的外泌体注射,请问200ug外泌体是用什么来量化的呢,是以外泌体内的蛋白含量 ...

请问您明白微克的量是怎么回事了吗
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