【新文速递】exo不同提取方法的比较

惜名 · 发表于 2015-7-23 10:28:36

作者采用了密度梯度离心、超离、超滤、ExoQuick、Exo-spin、qEV等手段分离exo。然后做各种检测，一些主要结果如下：
密度梯度离心可以得到最纯的exo，但是得率很低。超滤比较好，可以比较好的替代密度梯度离心。

重点是三个kit：ExoQuick的优点在于得到的颗粒大小比较好，大多数在<100nm，而后二者得到了较多>200nm的颗粒。
但ExoQuick有显著的缺点：蛋白污染。
作者通过加样等质量exo蛋白进行跑western的exo marker，发现ExoQuick的条带最弱，Exospin次之，qEV和密度梯度最好。因此作者推测，ExoQuick提取的exo中有其他蛋白的污染。

在讨论中，作者又对结果进行了系统的解释，最后表示：用蛋白定量的方法评估exo是不准哒。。。用Calnexin（一个只在细胞表达的蛋白）评价exo纯度也是不够充分哒。。。

niceman1987 · 发表于 2015-7-23 22:27:41

好，学习了

itooth · 发表于 2015-7-24 00:16:13

版主辛苦了！

CAAS · 发表于 2015-7-24 13:49:23

感谢分享！

kadak007 · 发表于 2015-7-26 21:24:21

感谢分享

mirexosome · 发表于 2015-7-28 17:33:34

楼主，能不能用试剂盒提取EXOSOME，然后用它作用于另一种活细胞

惜名 · 发表于 2015-7-29 08:16:22

mirexosome 发表于 2015-7-28 17:33
楼主，能不能用试剂盒提取EXOSOME，然后用它作用于另一种活细胞

当然可以的，当然可以，当然可以。
否则试剂盒公司早就破产了，否则试剂盒公司早就破产了，否则试剂盒公司早就破产了。
重要的事情说三遍。。。

mirexosome · 发表于 2015-7-29 08:41:23

惜名发表于 2015-7-29 08:16
当然可以的，当然可以，当然可以。
否则试剂盒公司早就破产了，否则试剂盒公司早就破产了，否则试剂盒公 ...

提取的试剂盒里面内不会有什么有害的试剂吧,因为我看到的大多数文章是用超离心法提取然后作用于活细胞,所以我不确定能否用试剂盒提

惜名 · 发表于 2015-7-29 10:49:15

mirexosome 发表于 2015-7-29 08:41
提取的试剂盒里面内不会有什么有害的试剂吧,因为我看到的大多数文章是用超离心法提取然后作用于活细胞,所 ...

这个确实需要考虑，SBI法离心的时候有2步，残余液体去除还是比较干净的。另外设立对照组也可以知道是否会对细胞有影响。

frankchan168 · 发表于 2015-7-29 16:53:26

谢谢分享

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