外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用

 找回密码
 立即注册
楼主: hzangs
打印 上一主题 下一主题

我的电镜图片

  [复制链接]

374

主题

1495

帖子

7045

积分

超级版主

Rank: 8Rank: 8

积分
7045
41#
 楼主| 发表于 2018-6-8 18:54:00 | 显示全部楼层
最好一次搞定,不要冻。我们的尝试是感觉冻过之后  效果不太好。  短时间放4°即可
回复 支持 反对

使用道具 举报

374

主题

1495

帖子

7045

积分

超级版主

Rank: 8Rank: 8

积分
7045
42#
 楼主| 发表于 2018-6-8 18:54:31 | 显示全部楼层
hjj 发表于 2018-6-5 14:35
请问老师,用超速离心提取的话,在两次100,000×g离心之间,倒掉上清之后,要加多少的PBS重悬呢?我是有4 ...

最好一次搞定,不要冻。我们的尝试是感觉冻过之后  效果不太好。  短时间放4°即可
回复 支持 反对

使用道具 举报

374

主题

1495

帖子

7045

积分

超级版主

Rank: 8Rank: 8

积分
7045
43#
 楼主| 发表于 2018-9-15 15:13:06 | 显示全部楼层
xjxahh 发表于 2018-8-23 07:42
大神,我这边实验老师说固定之后复染观察效果好,是这样吗?但是实验室要求自己固定好,固定起来好麻烦,主 ...

确实固定一下效果可能更好。 但是负染一下就足够了
回复 支持 反对

使用道具 举报

374

主题

1495

帖子

7045

积分

超级版主

Rank: 8Rank: 8

积分
7045
44#
 楼主| 发表于 2019-3-14 16:28:57 | 显示全部楼层
lixiaoshuang 发表于 2019-3-12 11:47
我想问一下电镜前,外泌体悬浮液不用做负染色吗?还有,您使用的电镜仪器的型号是JEM-1200EX吗?期待您的回 ...

请自己先查一下负染的原理。 明白原理了   你的问题也就迎刃而解了。
回复 支持 反对

使用道具 举报

374

主题

1495

帖子

7045

积分

超级版主

Rank: 8Rank: 8

积分
7045
45#
 楼主| 发表于 2019-6-21 09:49:07 | 显示全部楼层
Zhai 发表于 2019-6-20 14:54
请问楼主用的普通铜网还是超薄碳膜呢?

普通的。
回复 支持 反对

使用道具 举报

374

主题

1495

帖子

7045

积分

超级版主

Rank: 8Rank: 8

积分
7045
46#
 楼主| 发表于 2019-6-24 14:58:12 | 显示全部楼层
Zhai 发表于 2019-6-23 19:44
请问利用超速离心收集的外泌体在做TEM之前要用超滤管再洗一下吗?

可以洗。 我这个没洗
回复 支持 反对

使用道具 举报

374

主题

1495

帖子

7045

积分

超级版主

Rank: 8Rank: 8

积分
7045
47#
 楼主| 发表于 2019-9-18 13:07:26 | 显示全部楼层
hua2018 发表于 2019-9-16 13:47
请问用于拍电镜的外泌体能-80度保存吗?如果能建议不超过多久呢?

不建议冻存。  短时间  一两天的话  放在4°即可
回复 支持 反对

使用道具 举报

374

主题

1495

帖子

7045

积分

超级版主

Rank: 8Rank: 8

积分
7045
48#
 楼主| 发表于 2019-9-23 18:52:35 | 显示全部楼层
tututu 发表于 2019-9-23 14:40
楼主大大!麻烦帮忙看一下  我提的是外泌体提吗?  同一个图 左边右边的负染后的形状不太一样
此外我过了一 ...

看上去还是比较像的,但是背景略脏。 过滤膜的时候通常只能保证刚性的球体不会通过,囊泡是可以被挤压变形的,所以出现300nm的 正常。
回复 支持 反对

使用道具 举报

374

主题

1495

帖子

7045

积分

超级版主

Rank: 8Rank: 8

积分
7045
49#
 楼主| 发表于 2019-9-25 10:33:16 | 显示全部楼层
tututu 发表于 2019-9-24 10:46
谢谢楼主的回复!
再问一下,你们平时10w g超速离心,上清液中,外泌体含量有没有检测过,因为我做了2次, ...

我们没有尝试去检测超离后的上清中是否有外泌体。这个按照之前thery的理论,她是技术方面的大佬,她认为10万G后 上清是没外泌体的。 是不是操作中的问题,导致一些沉淀融入了上清中?
回复 支持 反对

使用道具 举报

374

主题

1495

帖子

7045

积分

超级版主

Rank: 8Rank: 8

积分
7045
50#
 楼主| 发表于 2019-12-29 11:41:34 | 显示全部楼层
ahLLL 发表于 2019-12-28 16:59
请问铜网需要亲水性处理吗?普通的200目铜网就能吸附外泌体?

没做其他处理。  就是按照那个protocol 直接做完  就OK了
回复 支持 反对

使用道具 举报

关闭

站长推荐上一条 /1 下一条

QQ|Archiver|手机版|外泌体之家 | exosomes & microvesicles  

GMT+8, 2024-5-4 11:29 , Processed in 0.168313 second(s), 21 queries .

Powered by Discuz! X3.3

© 2001-2017 Comsenz Inc.

快速回复 返回顶部 返回列表