外泌体wb结果

CARD · 发表于 2017-8-13 20:23:09

最近用60mL细胞上清液提取外泌体跑了一次wb，但是结果很奇怪，细胞刮取蛋白裂解后三个指标都出现了，而外泌体却一个都没有，这是什么原因？是我没提取成功，还是浓度太低，又或是其他什么原因，只能求助于大家

CARD · 发表于 2017-8-14 09:09:51

kao3234659 发表于 2017-8-14 05:10
贴一下你的外泌体分离的流程。

400g 10min, 2000g 30min,10000g 30min,100000g 70min,取沉淀PBS洗涤，100000g 70min,取沉淀PBS重悬

CARD · 发表于 2017-8-14 10:24:23

只是睡着了发表于 2017-8-14 09:18
想问下你样本超离之后有沉淀看到么？

有看到一点点的沉淀

CARD · 发表于 2017-8-16 09:50:15

meiling 发表于 2017-8-15 08:40
请问你做WB的流程是什么呢？有加DTT吗

没加,直接加loading了

CARD · 发表于 2017-8-23 19:52:41

slxiang 发表于 2017-8-23 17:24
我是新手，刚开始摸索提exosome的方法~望多指教

贝克曼的，sw41ti

CARD · 发表于 2017-9-26 20:23:37

zhaorui1993 发表于 2017-9-25 19:29
麻烦问一下，CD63分子量是多少

CD63的分子量好像不确定，50到30之间都有,抗体说明书上写的

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