外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用

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楼主: lczyld
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关于细胞培养上清中提取外泌体的相关问题

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发表于 2017-10-27 20:08:13 | 只看该作者
丫丫 发表于 2017-10-27 08:16
您好!能透露一下您用的exo-free FBS是什么牌子的吗?

自己超离制备的。
https://www.thermofisher.com/us/ ... e-depleted-fbs.html

https://www.systembio.com/produc ... -isolation/exo-fbs/
这两个链接是文章里经常看见的牌子.
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发表于 2017-10-29 17:12:37 | 只看该作者
baishixiaoyaozi 发表于 2017-8-1 23:36
这个很难给你确切答案,不同的细胞系分泌exosome的能力不一样,对血清饥饿的耐受不一样。你可以上pubmed或g ...

还有个问题想请教老师,我们想研究加药处理后细胞外泌体内容物的改变,看到过两种方式,1.加药处理2天后,连同药物和培养液一起丢弃,添加新的培养基继续培养收集外泌体。2.加药处理2天后,将含有药物的培养液收集并分离外泌体成分。这两种哪个方法更科学呢。感谢回答,谢谢
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发表于 2017-10-31 09:51:59 | 只看该作者
baishixiaoyaozi 发表于 2017-10-27 20:08
自己超离制备的。
https://www.thermofisher.com/us/en/home/life-science/cell-culture/mammalian-cell- ...

好的,非常感谢!
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发表于 2017-10-31 20:20:26 | 只看该作者
lczyld 发表于 2017-8-2 07:59
谢谢前辈的热心回答!请问您的120ml上清直接拿去超离么,看到文献里有浓缩这一步,不知道怎么做到的。因 ...

请问你买的这个试剂盒效果好吗
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发表于 2017-10-31 23:57:13 | 只看该作者
qyjinghui 发表于 2017-10-29 17:12
还有个问题想请教老师,我们想研究加药处理后细胞外泌体内容物的改变,看到过两种方式,1.加药处理2天后 ...

我倾向于选择第一个实验方案。
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发表于 2017-12-7 10:33:30 来自手机 | 只看该作者
baishixiaoyaozi 发表于 2017-8-1 23:36
这个很难给你确切答案,不同的细胞系分泌exosome的能力不一样,对血清饥饿的耐受不一样。你可以上pubmed或g ...

老师,您好,我想问你一下在采用pbs重悬洗去蛋白质的的时候是每个管加10ml吗?还是将几个离心管合到一起啊,
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发表于 2017-12-7 21:18:02 | 只看该作者
楠楠 发表于 2017-12-7 10:33
老师,您好,我想问你一下在采用pbs重悬洗去蛋白质的的时候是每个管加10ml吗?还是将几个离心管合到一起 ...

每个管加PBS,洗完后重悬再合并到一起。
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发表于 2018-4-16 14:46:39 | 只看该作者
lczyld 发表于 2017-9-2 16:09
提了一次,跑蛋白发现没有CD63的条带   现在在找问题 不知道浓缩的步骤对不对 你呢  ...

CD63跑完之后 它的分子量应该就不是24KD了 应该是43KD,你是用的abcam的抗体吗?
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