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楼主: 丫丫

请教关于血浆外泌体提取的问题

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发表于 2017-9-26 22:24:11 | 显示全部楼层
baishixiaoyaozi 发表于 2017-9-25 20:48
全血1000g离心10分钟,取血浆,然后1000g再离心10分钟去除血细胞。血浆用particle-free PBS稀释后离心,1 ...

谢谢啦  可以再问一下PBS稀释比例吗
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发表于 2017-9-27 21:26:43 | 显示全部楼层
zzycircle 发表于 2017-9-26 22:24
谢谢啦  可以再问一下PBS稀释比例吗

我是按照所用的超速离心管大小来稀释的。我用5毫升的离心管,加1毫升plasma,用4毫升PBS稀释(最少用2.5毫升PBS,超速离心样品体积不能少于离心管最大体积的70%)
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发表于 2017-10-29 21:55:16 | 显示全部楼层
baishixiaoyaozi 发表于 2017-9-27 21:26
我是按照所用的超速离心管大小来稀释的。我用5毫升的离心管,加1毫升plasma,用4毫升PBS稀释(最少用2.5 ...

好的谢谢啦  我用的5ml pbs稀释300u的
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发表于 2017-10-31 09:46:13 | 显示全部楼层
baishixiaoyaozi 发表于 2017-8-17 23:21
增加起始的exosome量,如果用Trizol试剂提取,沉淀时放在-20过夜,同时加入glycogen共沉淀。RNAseq,如果 ...

谢谢前辈回答。那么glycogen应该加多少呢?
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发表于 2017-10-31 23:53:17 | 显示全部楼层
深呼吸的行者 发表于 2017-10-31 09:46
谢谢前辈回答。那么glycogen应该加多少呢?

我一般加15-20微克,离心后就能看到沉淀。
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发表于 2017-12-6 09:53:48 | 显示全部楼层
丫丫 发表于 2017-3-29 09:53
我用的是SBI的,其他的还没用过

请问提取的质量如何?
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发表于 2018-7-25 21:04:17 来自手机 | 显示全部楼层
丫丫 发表于 2016-11-16 14:54
好的!十分感谢!

请问一下为什么离心前要用PBS稀释血浆,不稀释可以吗?
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发表于 2018-7-28 09:57:27 来自手机 | 显示全部楼层
baishixiaoyaozi 发表于 2017-9-5 21:31
如果用试剂盒的话,参考使用说明书。
我们实验室用EDTA,然后超速离心收集,对外泌体没有影响(至少用到 ...

用EDTA抗凝  配方的比例是多少呀
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发表于 2018-7-31 04:16:38 | 显示全部楼层
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发表于 2019-3-22 10:56:21 | 显示全部楼层
baishixiaoyaozi 发表于 2018-7-31 04:16
http://www.bd.com/en-us/offerings/capabilities/specimen-collection/blood-collection/venous-collect ...

请问一下提取血浆中的miRNA 需要什么试剂盒
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