请教关于血浆外泌体提取的问题

baishixiaoyaozi · 发表于 2017-9-5 21:31:47

slxiang 发表于 2017-9-5 10:41
请问肝素钠、EDTA和柠檬酸钠这三种抗凝剂对血浆外泌体的提取有影响么？哪种最合适 ...

如果用试剂盒的话，参考使用说明书。
我们实验室用EDTA，然后超速离心收集，对外泌体没有影响（至少用到外泌体的实验目前为止100%能够重复）。

slxiang · 发表于 2017-9-5 10:41:04

baishixiaoyaozi 发表于 2016-11-16 10:35
1. -80保存对外泌体没有太大的影响，注意避免反复冻融
2. It depends on your purpose, a few hundred micr ...

请问肝素钠、EDTA和柠檬酸钠这三种抗凝剂对血浆外泌体的提取有影响么？哪种最合适

baishixiaoyaozi · 发表于 2017-8-17 23:21:40

深呼吸的行者发表于 2017-8-17 21:40
前辈你好，我们想提取外泌体RNA进行测序的话有什么办法提高RNA得率吗？

增加起始的exosome量，如果用Trizol试剂提取，沉淀时放在-20过夜，同时加入glycogen共沉淀。RNAseq，如果用total RNA大约需要1微克；如果用纯化的small RNA大约需要50-100纳克。

深呼吸的行者 · 发表于 2017-8-17 21:40:21

baishixiaoyaozi 发表于 2016-11-16 10:35
1. -80保存对外泌体没有太大的影响，注意避免反复冻融
2. It depends on your purpose, a few hundred micr ...

前辈你好，我们想提取外泌体RNA进行测序的话有什么办法提高RNA得率吗？

小葱 · 发表于 2017-7-14 16:57:15

惘痕发表于 2017-3-16 22:40
基本没有什么影响，做过对比分析

对比分析的数据是否已发表，可以分享链接么？谢谢

小葱 · 发表于 2017-7-14 16:55:50

baishixiaoyaozi 发表于 2016-11-16 10:35
1. -80保存对外泌体没有太大的影响，注意避免反复冻融
2. It depends on your purpose, a few hundred micr ...

您好，针对于这个问题，我想问一下，是否有相关的文章可以参考，可以分享一下么？非常感谢。

丫丫 · 发表于 2017-5-2 17:09:14

八戒在五湖发表于 2017-4-23 09:59
提取效果怎么样呀，我的血浆没加抗凝，都凝固了，不知道能不能提

都凝固了还怎么提？我也不知道哎，没遇到过这种情况。用试剂盒提的还可以吧。

八戒在五湖 · 发表于 2017-4-23 09:59:02

提取效果怎么样呀，我的血浆没加抗凝，都凝固了，不知道能不能提

丫丫 · 发表于 2017-3-29 09:53:29

八戒在五湖发表于 2017-3-27 10:23
那就是没加抗凝的血浆也是可以提外泌体的？请问有什么合适的试剂盒可以推荐吗 ...

我用的是SBI的，其他的还没用过

八戒在五湖 · 发表于 2017-3-27 10:23:58

丫丫发表于 2017-3-24 09:46
根据试剂盒的要求，血浆提外泌体前加了凝血酶素D

那就是没加抗凝的血浆也是可以提外泌体的？请问有什么合适的试剂盒可以推荐吗

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