外泌体BCA测出蛋白浓度太低，请教大家

baishixiaoyaozi

0.4ug/ul， 浓度还可以，一般上样量5－10ug左右就可以检测到绝大部分标志蛋白了（CD63，Tsg101，Flotilin 1）。

baishixiaoyaozi

张外泌体 发表于 2016-12-22 08:43
你好，我测出来的浓度已经达到了0.5ug/ul,用的是国产抗体，结果怎么都做不出来，想问下是抗体的原因吗？ ...

CD63：Santa Cruz
TSG101 and Flotillin 1： BD Bioscience
这些是我用的抗体，效果还不错。
你试试actin或GAPDH抗体，外泌体中可以检测到这两个蛋白。或者转膜后用立春红染色看看蛋白含量。

baishixiaoyaozi

huangjingwei24 发表于 2018-4-18 16:01
请教一下，按照这个标准，蛋白浓度 0.4ug/ul，总上样量5ug， 也需要125ul了啊，SDS-PAGE最大的孔也就80ul ...

5 ÷ 0.4 = 12.5ul
我应该没算错吧。

baishixiaoyaozi

huangjingwei24 发表于 2018-4-18 16:01
请教一下，按照这个标准，蛋白浓度 0.4ug/ul，总上样量5ug， 也需要125ul了啊，SDS-PAGE最大的孔也就80ul ...

5 ÷ 0.4 = 12.5ul
我应该没算错吧。