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外泌体BCA测出蛋白浓度太低,请教大家

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发表于 2016-11-15 13:05:59 | 只看该作者 回帖奖励 |正序浏览 |阅读模式
我用2016年的protocol超离的外泌体,看不到沉淀,重悬在200ulPBS中-80保存,4天后不加裂解液,直接BCA测定蛋白浓度,想跑标志蛋白的western,蛋白浓度很低,只有0.396ug/ul,请问大家可能是哪里出了问题?
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 楼主| 发表于 2016-11-16 00:16:24 | 只看该作者
baishixiaoyaozi 发表于 2016-11-15 23:21
0.4ug/ul, 浓度还可以,一般上样量5-10ug左右就可以检测到绝大部分标志蛋白了(CD63,Tsg101,Flotilin 1 ...

谢谢,明天就准备干起来了!
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发表于 2022-10-12 21:31:34 | 只看该作者
sy123 发表于 2022-3-22 17:46
我提的外泌体:40ml细胞上清   沉淀法提取   200ul重悬  BCA测浓度  0.3ug/ul

您好,请问你的是什么细胞呢?还有细胞数大概是多少呢
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发表于 2022-9-12 10:11:53 | 只看该作者
发祥于中国北部、朝鲜、日本、俄罗斯等北半球温带地区。据记载,公元前古巴比伦、古希腊已广泛种植。其中在古希腊的建筑装饰、铸造的钱币和克里特岛的壁画中,都发现有用玫瑰花做主题的雕刻及绘画。  公元初期,古罗马帝国开始兴盛,古埃及人把西南亚的玫瑰贩往罗马。12世纪后,欧洲各国兴起玫瑰种植业,尤其在英国

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发表于 2022-8-14 21:48:17 | 只看该作者
请问一下  我用裂解液裂解了之后BCA测的蛋白浓度为0.2ug/ul,上样量30ul  直接是白板
想试一下不裂解跑一次 不裂解的话直接加loading buffer需要加多少呀
还有如果要和细胞裂解液一起 是不是要保证两者的蛋白含量一致
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发表于 2022-4-22 20:21:29 | 只看该作者
kaduoniya 发表于 2022-3-25 11:13
请问,您用的是什么细胞,培养多久后收集的细胞上清

MDA-MB231  48小时 方便加一个微信聊吗?还想请教你一些问题,13652032811
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发表于 2022-3-25 11:13:31 | 只看该作者
sy123 发表于 2022-3-22 17:46
我提的外泌体:40ml细胞上清   沉淀法提取   200ul重悬  BCA测浓度  0.3ug/ul

请问,您用的是什么细胞,培养多久后收集的细胞上清
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发表于 2022-3-22 17:46:59 | 只看该作者
我提的外泌体:40ml细胞上清   沉淀法提取   200ul重悬  BCA测浓度  0.3ug/ul  
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发表于 2020-7-9 18:08:57 | 只看该作者
exosun 发表于 2017-2-12 19:08
都是实验室可以直接领的试剂,没有试剂盒。

你好,请问外泌体的裂解你是怎么配制的呀
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发表于 2020-7-6 18:50:32 | 只看该作者
JKF 发表于 2018-1-23 21:25
测BCA 需要先裂解吗

你好 你裂解了么
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发表于 2019-10-22 15:00:56 | 只看该作者
CheungKL 发表于 2019-10-22 14:47
你好,请问你wb的外泌体样品是怎么处理的?跑的是哪些marker呢?谢谢

200ml培养上清超离,2mlPBS重悬。检测了CD63
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