超速离心法分离血清

我是小白

请问大家用超速离心法分离血清外泌体时，血清至少需要多少呢，

baishixiaoyaozi

我是小白 发表于 2016-11-24 17:44
请问有提取血清的超速离心法的protocol吗？我自己也找了好多步骤，不知道用哪一个？ ...

我们实验室用两步离心，10000xg，30分钟，去除micro vesicles。100000-150000xg，2小时。

ashey

baishixiaoyaozi 发表于 2016-11-23 09:48
是的，下次实验打算多离心一下，或者用更大的离心力150000xg。

期待楼主分享下一步的经验

anlinyuan

请问您用多大的离心管呢？

1010275183

JKF 发表于 2018-1-15 20:20
大家好 我最近也在用超离分离血清外泌体。 请问超速离心提取小鼠血清外泌体大概需要多少的血清呢，我今天用 ...

我也遇到同样的问题，请问你是怎么解决的呢

baishixiaoyaozi

ronaldchen 发表于 2018-1-17 14:10
也就是说，您吸到最后还剩一点倾斜，还是完全把液体吸干了的？
我之前是留了一点，
可以试试您的方法 ...

倾斜，让残留的液体沿着管壁流下来，尽量吸干。

ronaldchen

baishixiaoyaozi 发表于 2018-1-16 03:25
吸的，不敢倒。plamsa第一次超离后，吸取上清，加PBS洗，再超离。我一般吸到最后一点会把管子倾斜，然后 ...

也就是说，您吸到最后还剩一点倾斜，还是完全把液体吸干了的？
我之前是留了一点，
可以试试您的方法

baishixiaoyaozi

ronaldchen 发表于 2018-1-15 14:15
你好，你是吸的还是倒的啊，我是1ml稀释到12ml超离10g 2小时，吸到剩一点，最后跑WB做不出来，不知道是不 ...

吸的，不敢倒。plamsa第一次超离后，吸取上清，加PBS洗，再超离。我一般吸到最后一点会把管子倾斜，然后吸掉管壁上残留的液体。

JKF

大家好 我最近也在用超离分离血清外泌体。 请问超速离心提取小鼠血清外泌体大概需要多少的血清呢，我今天用了将近1毫升的血清，PBS补齐到13.2毫升， 100000g离心力离心两次，每次70分钟，最后沉淀看不到

ronaldchen

baishixiaoyaozi 发表于 2018-1-13 00:05
做过CD81。
最近想用albumin的抗体检测一下血清蛋白污染。

我跑过血浆的albumin，反正超离1次，albumin还残留非常多。
也有可能是我吸的，不敢吸完，还剩一点液体，里面很多albumin

ronaldchen

baishixiaoyaozi 发表于 2018-1-13 00:05
做过CD81。
最近想用albumin的抗体检测一下血清蛋白污染。

你好，你是吸的还是倒的啊，我是1ml稀释到12ml超离10g 2小时，吸到剩一点，最后跑WB做不出来，不知道是不是吸掉了。

baishixiaoyaozi

ronaldchen 发表于 2018-1-12 15:02
你做过western么，谢谢

做过CD81。
最近想用albumin的抗体检测一下血清蛋白污染。