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标题: 请教外泌体电镜图片的问题 [打印本页]

作者: 生物小博 时间: 2016-7-15 09:49
标题: 请教外泌体电镜图片的问题
大家好，我第一次打电镜，步骤是这样的取exosome 悬液 20 μL 载样于铜网表面，室温静置 1min，用滤纸吸干液体；滴加磷钨酸室温复染 5 min，用滤纸从侧面小心吸干复染液。发现了一些问题，请教下大家。我采用的色谱排阻的方法分离的血清外泌体，分离后收集外泌体样品做电镜实验后发现杂质很多，[size=14.6667px]影响找外泌体视野，不知道里面的杂质都是啥。有没有可能铜网自身就带有一些杂质，还是我分离方法自身带有杂质残留到收集液中。

作者: hzangs 时间: 2016-7-15 10:20
看这个图倒像是用高聚物沉淀下来的

杂质考虑是染料里的，参考直径和形态，基本上这个图没办法用

作者: 生物小博 时间: 2016-7-15 14:38

hzangs 发表于 2016-7-15 10:20
看这个图倒像是用高聚物沉淀下来的杂质考虑是染料里的，参考直径和形态，基本上这个图没办法 ...

你意思是说磷钨酸里可能带有杂质？我是用琼脂糖凝胶柱分离的外泌体，有没有可能凝胶有问题，我查了下凝胶是球形的，并且凝胶粒径和外泌体粒径大小差不多。会不会凝胶球残留到收集液中了

作者: hzangs 时间: 2016-7-15 15:07

生物小博发表于 2016-7-15 14:38
你意思是说磷钨酸里可能带有杂质？我是用琼脂糖凝胶柱分离的外泌体，有没有可能凝胶有问题，我查了下 ...

你是自己装的柱子？有可能会有柱材的污染，但是这个除非柱材出来了问题不然不应该有这么多杂质的

作者: 生物小博 时间: 2016-7-16 09:39

hzangs 发表于 2016-7-15 15:07
你是自己装的柱子？有可能会有柱材的污染，但是这个除非柱材出来了问题不然不应该有这么多杂质的 ...

对的自己装的琼脂糖凝胶柱我准备做个试验验证下看看空柱子洗脱的话会不会出现这些杂质

作者: hzangs 时间: 2016-7-16 19:58

生物小博发表于 2016-7-16 09:39
对的自己装的琼脂糖凝胶柱我准备做个试验验证下看看空柱子洗脱的话会不会出现这些杂质 ...

很厉害~ 我还没有挑战过自己装这个柱子 O(∩_∩)O哈哈~

你可以参考一下paper，目前有写paper会写的比较清楚说明自己是如何装柱子的

作者: afra 时间: 2017-2-27 16:31

hzangs 发表于 2016-7-16 19:58
很厉害~ 我还没有挑战过自己装这个柱子 O(∩_∩)O哈哈~

你可以参考一下paper，目前有写paper会写的比 ...

请问知道那个公司有卖装好的琼脂糖凝胶柱的吗？
也打算用凝胶柱分离血清，血浆中的外泌体。
谢谢！

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