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标题: 10ml左右的上清 Exo裂解后BCA法测定蛋白浓度50ug/ul 疯了 [打印本页]

作者: 免疫小子 时间: 2016-7-14 19:57
标题: 10ml左右的上清 Exo裂解后BCA法测定蛋白浓度50ug/ul 疯了
请问是什么原因呢？细胞数在5×10的6次方左右是不是血清的原因（超离血清制备出问题，残留牛白蛋白）

作者: 免疫小子 时间: 2016-7-15 21:11

Johnny 发表于 2016-7-15 17:48
你用什么方法提取的？

基本可以断定杂蛋白污染的问题

现在找到原因了是超离血清没有离好的原因

作者: Iris 时间: 2016-7-15 22:44
伙伴们，得到的外泌体测BCA根本测不到，还打算跑wb,可以吗，外泌体冻干了，要裂解吧？怎么裂解呢，求助各位大神

作者: pytruth 时间: 2016-7-18 09:40

Iris 发表于 2016-7-15 22:44
伙伴们，得到的外泌体测BCA根本测不到，还打算跑wb,可以吗，外泌体冻干了，要裂解吧？怎么裂解呢，求助各位 ...

你是用试剂盒提的吗？我用试剂盒提的细胞上清里BCA也测不到蛋白量，后来RIPA裂解就能测到了

作者: xunqiben 时间: 2017-2-10 10:57

pytruth 发表于 2016-7-18 09:40
你是用试剂盒提的吗？我用试剂盒提的细胞上清里BCA也测不到蛋白量，后来RIPA裂解就能测到了 ...

是不是稀释倍数太大的原因？上清的Exosome量确实不能算多，最受我们都用70ml呢

作者: xunqiben 时间: 2017-2-10 17:34
小心被一些盐分和杂蛋白污染了

作者: DBLB 时间: 2019-10-11 19:30

pytruth 发表于 2016-7-18 09:40
你是用试剂盒提的吗？我用试剂盒提的细胞上清里BCA也测不到蛋白量，后来RIPA裂解就能测到了 ...

您好，您用的是哪一种RIPA，最后测出来浓度怎么样

作者: zhangchao 时间: 2020-7-5 17:51

pytruth 发表于 2016-7-18 09:40
你是用试剂盒提的吗？我用试剂盒提的细胞上清里BCA也测不到蛋白量，后来RIPA裂解就能测到了 ...

只用RAPA裂解么不加PMSF么？

作者: zhangchao 时间: 2020-7-5 17:52

DBLB 发表于 2019-10-11 19:30
您好，您用的是哪一种RIPA，最后测出来浓度怎么样

你好方便加个微信么我也是做外泌体的想请教一些问题 13844196076

作者: zhangchao 时间: 2020-7-9 18:09

pytruth 发表于 2016-7-18 09:40
你是用试剂盒提的吗？我用试剂盒提的细胞上清里BCA也测不到蛋白量，后来RIPA裂解就能测到了 ...

你好，请问外泌体的裂解你是怎么配制的呀

作者: 苏格拉没有底 时间: 2020-8-8 17:16

pytruth 发表于 2016-7-18 09:40
你是用试剂盒提的吗？我用试剂盒提的细胞上清里BCA也测不到蛋白量，后来RIPA裂解就能测到了 ...

试剂盒提取之后，PBS重悬，是直接在溶液里加入RIPA吗？

作者: 苏格拉没有底 时间: 2020-8-8 17:17

zhangchao 发表于 2020-7-5 17:51
只用RAPA裂解么不加PMSF么？

RIPA貌似直接带的PMSF的

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