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标题: 血清中Exosome [打印本页]
作者: fan    时间: 2015-1-19 00:10
标题: 血清中Exosome
有谁研究过 -80血清中exosome 保存期吗？ 以及随着时间的增加会降解吗?
作者: 木瓜31    时间: 2015-1-20 16:42
没有看到直接检测冻存前后exosome数量的文章，但有检测其内含物miRNA的，可以参见这篇文献：miRNA in Plasma Exosome is Stable under Different
Storage Conditions 验证的是血浆样本，不过应该血清血浆差不多吧
作者: fan    时间: 2015-1-20 18:30
木瓜31 发表于 2015-1-20 16:42
没有看到直接检测冻存前后exosome数量的文章，但有检测其内含物miRNA的，可以参见这篇文献：miRNA in Plasm ...

好滴！谢谢！
作者: easerce    时间: 2015-2-2 12:18
我放了半年都质检结果蛮好哈
作者: fan    时间: 2015-2-7 12:55
easerce 发表于 2015-2-2 12:18
我放了半年都质检结果蛮好哈

ok 谢谢哈！
作者: xuemei7868650    时间: 2015-2-15 09:04
负80冻存的血清还可以用来提取外泌体吗？
作者: fan    时间: 2015-3-4 14:31
xuemei7868650 发表于 2015-2-15 09:04
负80冻存的血清还可以用来提取外泌体吗？

可以的!
作者: wanghx_85    时间: 2015-5-12 16:26
新手咨询下各位大侠，提取患者血浆或血清中的EXO，需要抽取多少ml的血液标本呢？谢谢
作者: bobo    时间: 2015-5-15 08:20
本帖最后由 bobo 于 2015-5-15 08:21 编辑

从胎牛血清中去除exosome，离心机的转速应该达到多少转呢？谢谢
作者: wanghx_85    时间: 2015-5-16 12:33
bobo 发表于 2015-5-15 08:20
从胎牛血清中去除exosome，离心机的转速应该达到多少转呢？谢谢

自己没做过，看到文献及相关论坛中一般是10万-12万转，过夜，仅供参考哈！
作者: fan    时间: 2015-5-17 10:35
wanghx_85 发表于 2015-5-12 16:26
新手咨询下各位大侠，提取患者血浆或血清中的EXO，需要抽取多少ml的血液标本呢？谢谢 ...

血清或者血浆中EXOSOMES是很多的，需要的量不是很大。SBI 的KIT 250ul 足够了！
作者: wanghx_85    时间: 2015-5-19 09:18
fan 发表于 2015-5-17 10:35
血清或者血浆中EXOSOMES是很多的，需要的量不是很大。SBI 的KIT 250ul 足够了！ ...

哦，谢谢~我试一下。
作者: bobo    时间: 2015-5-20 14:32
wanghx_85 发表于 2015-5-16 12:33
自己没做过，看到文献及相关论坛中一般是10万-12万转，过夜，仅供参考哈！ ...

实验的地方呢，没有超速离心机，所以就涉及到了从一个实验室到另一个实验室，路程还不近，怎么才能不让血清，和细胞培养液污染呢
作者: wanghx_85    时间: 2015-5-21 11:21
bobo 发表于 2015-5-20 14:32
实验的地方呢，没有超速离心机，所以就涉及到了从一个实验室到另一个实验室，路程还不近，怎么才能不让血 ...

血清和培养液装在无菌试管中，拧您盖子，再缠几层封口胶就可以了，再用个干净盒子把他们装上，一般问题不大的。我们以前都这么弄过。
作者: bobo    时间: 2015-5-21 20:32
wanghx_85 发表于 2015-5-21 11:21
血清和培养液装在无菌试管中，拧您盖子，再缠几层封口胶就可以了，再用个干净盒子把他们装上，一般问题不 ...

太好啦，谢谢
作者: wanghx_85    时间: 2015-6-12 08:40
bobo 发表于 2015-5-21 20:32
太好啦，谢谢

不客气，祝您实验顺利~
作者: ohyeahxwl    时间: 2015-6-16 11:06
请教楼主，我想从小鼠体内提取exosome，下游实验是用于提取rna做qpcr检测miRNA，每只小鼠也就500ul的血清，每组4只共2mL的血清，用超速离心的方法，请问2mL血清够用吗？
作者: limitzy    时间: 2015-6-18 14:37
学习了，谢谢
作者: 赤壁潜蛟    时间: 2017-5-31 17:15
SBI exoquick试剂盒提取血清的外泌体，按照试剂盒要求250ul serum提取外泌体，这个量能用于二代测序么。。
作者: fan    时间: 2017-6-7 10:24
赤壁潜蛟 发表于 2017-5-31 17:15
SBI exoquick试剂盒提取血清的外泌体，按照试剂盒要求250ul serum提取外泌体，这个量能用于二代测序么。。 ...

这个是不够的，至少需要2ml,当然了也要看你要测什么，miRNA mRNA
作者: carfieldnmu    时间: 2017-6-7 21:32
bobo 发表于 2015-5-15 08:20
从胎牛血清中去除exosome，离心机的转速应该达到多少转呢？谢谢

我十万g离心8h吧  
作者: huangjingwei24    时间: 2017-6-28 14:13
carfieldnmu 发表于 2017-6-7 21:32
我十万g离心8h吧

我看到的文献里面说  10w-14w g 离心 16-18h    所以我都离心过夜的



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