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标题: 什么试剂盒提取外泌体好？试剂盒中的步骤.什么样子？ [打印本页]
作者: weaver    时间: 2015-10-31 20:57
标题: 什么试剂盒提取外泌体好？试剂盒中的步骤.什么样子？
大家用的什么试剂盒提取外泌体，买的试剂盒信息能否完整的上传么？实验中用到哪些耗材和试剂呀。菜鸟紧急求助 谢啦
作者: 丁倩倩    时间: 2015-11-6 10:57
我们实验室用101Bio比较多
P100PureExo  cell medium exosome
P101PureExo  serum exosome
西美杰公司代理
提取过程按照说明书即可，比较特殊的是需要在玻璃管中反应
作者: weaver    时间: 2015-12-8 10:59
丁倩倩 发表于 2015-11-6 10:57
我们实验室用101Bio比较多
P100PureExo  cell medium exosome
P101PureExo  serum exosome

谢谢~ 不知道101bio 过程是不是很繁琐呀。。
作者: hzangs    时间: 2015-12-8 11:51
weaver 发表于 2015-12-8 10:59
谢谢~ 不知道101bio 过程是不是很繁琐呀。。

qEV   
个人感觉 挺好
作者: wangjoseph    时间: 2015-12-9 14:24
Exo-spin, 沉淀只需要1个小时，不需要过夜，更加快速。
作者: liuhaoisboy    时间: 2015-12-10 22:22
hzangs 发表于 2015-12-8 11:51
qEV   
个人感觉 挺好

实在想问你们是不是拿了钱 踢人推销
作者: hzangs    时间: 2015-12-11 10:45
本帖最后由 hzangs 于 2015-12-11 11:04 编辑
liuhaoisboy 发表于 2015-12-10 22:22
实在想问你们是不是拿了钱 踢人推销

你要是那么认为，我也没办法。毕竟，我没办法左右别人的思想。

我用过超离，用过沉淀kit，用过SEC。  沉淀的kit 我不想再多说什么了  有条件自然是超离好。
SEC 就是凝胶排阻， 目前我用过的就一个qEV，不过听说美国还有一个品牌， 有途径的话 也可以尝试。
qiagen的kit  我没使用过，所以不敢推荐。  仅此而已

我总不能给你推荐我认为不好用的沉淀kit吧  不是吗  
作者: hzangs    时间: 2015-12-11 11:16
本帖最后由 hzangs 于 2015-12-11 11:30 编辑
wangjoseph 发表于 2015-12-9 14:24
Exo-spin, 沉淀只需要1个小时，不需要过夜，更加快速。

你好，第一次听说Cell Guidance System的这个产品。刚刚在google上也查了下。粗略了解，感觉这个产品是使用沉淀法分离exosome 然后在通过一个柱子纯化exosome 去掉杂蛋白。 请问层主有没有一些分离产率、蛋白含量之类的数据，很想了解一下这个产品
作者: onlyrush    时间: 2015-12-11 12:01
hzangs 发表于 2015-12-11 11:16
你好，第一次听说Cell Guidance System的这个产品。刚刚在google上也查了下。粗略了解，感觉这个产品是使 ...

用过一次qEV，最后WB检测发现CD63主要分布在5.5-6.5ml,3-4ml中没有CD63，请问你有否遇到这种情况？如何解决？
作者: hzangs    时间: 2015-12-11 12:34
本帖最后由 hzangs 于 2015-12-11 12:42 编辑
onlyrush 发表于 2015-12-11 12:01
用过一次qEV，最后WB检测发现CD63主要分布在5.5-6.5ml,3-4ml中没有CD63，请问你有否遇到这种情况？如何解 ...

我一般杂TSG101 和 ALIX。 确实没有遇到过这个情况。  
5.5-6.5的话  你杂到的可能不是exosome里的CD63。根据凝胶排阻的性质， 5.5-6.5流出来的组分应该是更小直径的。  我当时使用qEV 的时候 5.5-6.5都是蛋白浓度很高的组分。 目测应该是培液里的蛋白。

不仅针对qEV，其他的分离方法，沉淀法 超离法等等，都建议你 多用几个marker杂一下，  至少应该用2个marker去杂一杂。  根据经验来说，不同的细胞分泌的exosome 表面marker的组成和丰度都有不同。之前中山大学那边的朋友在杂的时候 也有个别marker杂不出来，后来换了marker 去杂 好像就OK了

希望能帮到你
作者: wangjoseph    时间: 2015-12-18 16:48
hzangs 发表于 2015-12-11 11:16
你好，第一次听说Cell Guidance System的这个产品。刚刚在google上也查了下。粗略了解，感觉这个产品是使 ...

http://www.nature.com/articles/srep07639
作者: 柚子    时间: 2019-7-26 18:58
liuhaoisboy 发表于 2015-12-10 22:22
实在想问你们是不是拿了钱 踢人推销

说话不要太武断



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