外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用

标题: 急求！！！ [打印本页]
作者: wooway    时间: 2015-5-25 22:53
标题: 急求！！！
最近要做关于外泌体的动物实验，想请教一下大家有无做过大鼠的外泌体尾静脉注射，每次注射的剂量和注射的天数分别是多少？
作者: 惜名    时间: 2015-5-26 08:01
急复：
剂量：这个要自己摸索了。。。
天数：以Atheroprotective communication between endothelial cells and smooth muscle cells through miRNAs 2012 Nat Cell Biol为例，尾静脉注射6周、每周2次，可以导致APOE小鼠动脉粥样硬化斑块的改变。因此，每周2次的频率是可以考虑的，这也是尾静脉注射miRNA的常用频率。至于持续时间，还是看你动物模型了吧~
作者: wooway    时间: 2015-5-26 09:01
惜名 发表于 2015-5-26 08:01
急复：
剂量：这个要自己摸索了。。。
天数：以Atheroprotective communication between endothelial cells ...

非常感谢
作者: 15244762219    时间: 2015-5-27 10:13
是直接往鼠里面注射exosome吗？
作者: wooway    时间: 2015-5-27 11:05
15244762219 发表于 2015-5-27 10:13
是直接往鼠里面注射exosome吗？

是的！！通过尾静脉！！！
作者: yy8651    时间: 2015-5-27 11:28
那你在做什么动物模型？这个exosomes可以到达你的目的位置吗？
作者: 15244762219    时间: 2015-5-27 14:55
一只怎么也得3，4ug吧。那你打进去的exosome带GFP吗？是要看转移吗？
作者: wooway    时间: 2015-5-27 17:03
15244762219 发表于 2015-5-27 14:55
一只怎么也得3，4ug吧。那你打进去的exosome带GFP吗？是要看转移吗？

不带的哦  就是纯看是否有药效的
作者: wooway    时间: 2015-5-27 17:06
yy8651 发表于 2015-5-27 11:28
那你在做什么动物模型？这个exosomes可以到达你的目的位置吗？

现在只是做预实验的，做的动脉粥样硬化模型，我觉得打到血液系统里应该是可以到达目的位置的吧！！！
作者: TiTi    时间: 2015-7-4 14:04
我每次都打100ug，是不是太多啦？
但活体成像显示2hr后全部滞留肝脏
作者: wooway    时间: 2015-7-4 15:16
TiTi 发表于 2015-7-4 14:04
我每次都打100ug，是不是太多啦？
但活体成像显示2hr后全部滞留肝脏

感觉是好多！！！我看的文献大都打三个星期，每周两次或三次，几ug，十几ug一次都有。但是还没见过一次100ug的
作者: TiTi    时间: 2015-7-6 21:45
开始怕荧光不够强，所以打100ug。下面准备减量了，下周打20ug试试。
不知道有没有做过裸鼠活体荧光的大侠能给个参考
作者: wooway    时间: 2015-7-6 23:17
TiTi 发表于 2015-7-6 21:45
开始怕荧光不够强，所以打100ug。下面准备减量了，下周打20ug试试。
不知道有没有做过裸鼠活体荧光的大侠能 ...

我想问下你的荧光是直接用染料染得外泌体么？？如果是的话你是怎么去除多余的染料的？也就是那些没有染上的染料？
作者: TiTi    时间: 2015-7-7 10:26
用超速离心可以去掉绝大部分多余染料，最精确的办法是蔗糖密度垫离心
作者: wooway    时间: 2015-7-8 09:50
TiTi 发表于 2015-7-7 10:26
用超速离心可以去掉绝大部分多余染料，最精确的办法是蔗糖密度垫离心

没有超速离心机
作者: 陆峰彬    时间: 2016-5-7 15:55
TiTi 发表于 2015-7-6 21:45
开始怕荧光不够强，所以打100ug。下面准备减量了，下周打20ug试试。
不知道有没有做过裸鼠活体荧光的大侠能 ...

请问您做的细胞外泌体量这么多？
作者: TiTi    时间: 2016-5-11 11:17
陆峰彬 发表于 2016-5-7 15:55
请问您做的细胞外泌体量这么多？

100mL培养液提出100~150ug
作者: lczyld    时间: 2017-5-27 12:21
TiTi 发表于 2016-5-11 11:17
100mL培养液提出100~150ug

请问 ，怎么定量的
作者: TiTi    时间: 2017-6-10 02:58
lczyld 发表于 2017-5-27 12:21
请问 ，怎么定量的

BCA, 最好再加上NTA



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