外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用

标题: 差速离心中困惑已久的问题 [打印本页]

作者: 八戒在五湖    时间: 2017-10-22 23:42
标题: 差速离心中困惑已久的问题
我之前离心步骤一般都是1000rpm,10min去除死细胞,10,000g,30min,去除细胞碎片,过0.22um滤膜,最后160,000g,2h,我的问题是,为什么不能直接10,000g离心30min?为什么文献里基本都有一个300或1000rpm的低速离心处理。

作者: 小苗    时间: 2017-10-23 10:13
因为在10000g这个离心力下,是可以分离出大的囊泡的,如果一下子就用这个离心力,那就使这部分不纯
作者: 八戒在五湖    时间: 2017-10-23 11:37
小苗 发表于 2017-10-23 10:13
因为在10000g这个离心力下,是可以分离出大的囊泡的,如果一下子就用这个离心力,那就使这部分不纯 ...

是无法充分离出大囊泡?
作者: xcf201314    时间: 2017-10-23 15:42
直接1万,死细胞容易破,然后死细胞里的不管大小囊泡都出来了。
作者: 八戒在五湖    时间: 2017-10-23 16:56
xcf201314 发表于 2017-10-23 15:42
直接1万,死细胞容易破,然后死细胞里的不管大小囊泡都出来了。

谢谢回答啦
作者: qyjinghui    时间: 2017-10-29 17:18
小苗 发表于 2017-10-23 10:13
因为在10000g这个离心力下,是可以分离出大的囊泡的,如果一下子就用这个离心力,那就使这部分不纯 ...

借楼咨询老师一个问题,我们想研究药物处理后外泌体内容物的变化,看到大致有两种收集cm的方式。1.加药处理2天,将含有药物的培养液丢弃,加上新鲜的培养基继续培养后再收集、分离外泌体。2.加药处理2天,直接收集含有药物的培养液分离外泌体成分。请问老师这两种,哪个更好呢,感谢回答,谢谢




欢迎光临 外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用 (https://www.exosome.com.cn/) Powered by Discuz! X3.3