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楼主: yy8651
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用于exosome提取的无血清培养基怎么制备?

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发表于 2015-12-10 11:42:31 | 只看该作者
yy8651 发表于 2015-12-10 11:38
我认为这种方法提取所得大部分是凋亡小体

这样提出来的"外泌体"应该值得商榷
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发表于 2015-12-22 05:18:04 | 只看该作者
liuhaoisboy 发表于 2015-12-9 21:42
这样提出来的"外泌体"应该值得商榷

我们做过Nanosight, 绝大部分小于100nm,凋亡小体似乎比这个大还是符合外泌体的定义的。
此外,我们还进行了WB验证,Markers和阴性对照均符合预期。
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发表于 2015-12-23 09:42:06 | 只看该作者
luckkit 发表于 2015-12-22 05:18
我们做过Nanosight, 绝大部分小于100nm,凋亡小体似乎比这个大还是符合外泌体的定义的。
此外,我们还进 ...

有些细胞对血清饥饿的耐受情况比较好, 所以在无血清培养基的培养下 发生凋亡的时间会比较晚,因此还是可以分到exosome。 只是有些细胞 可能确实会收不到exosome了
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发表于 2015-12-23 11:01:12 | 只看该作者
请问大家,对血清进行超离处理去除外泌体,如何保证血清不被污染呢?
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发表于 2015-12-23 14:10:56 | 只看该作者
yy8651 发表于 2015-4-23 18:59
非常感谢,那我打算离心12小时。离心力多大呢?11000g是否足够?

你少了一个0
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发表于 2016-6-22 09:52:49 | 只看该作者
luckkit 发表于 2015-12-22 05:18
我们做过Nanosight, 绝大部分小于100nm,凋亡小体似乎比这个大还是符合外泌体的定义的。
此外,我们还进 ...

也想尝试一下MSC能否用无血清培养后提取exo,请问你培养的是什么细胞呢?
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发表于 2016-7-11 08:45:06 | 只看该作者
luckkit 发表于 2015-12-22 05:18
我们做过Nanosight, 绝大部分小于100nm,凋亡小体似乎比这个大还是符合外泌体的定义的。
此外,我们还进 ...

你好,nanosight的宝贵经验可否分享一下。我也打算在实验设计里面加入。但是还没具体认识448326307@qq.com。万谢
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发表于 2016-7-22 11:07:52 | 只看该作者
”超速离心之后是否需要鉴定血清中是否还残存exosome?
超离之后,血清底部会有一层层的悬浮物,吸取时需要丢弃多少?“
这个问题没人回答吗?望各位不吝赐教!
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发表于 2016-7-22 11:08:57 | 只看该作者
yy8651 发表于 2015-4-28 13:45
超速离心之后是否需要鉴定血清中是否还残存exosome?
超离之后,血清底部会有一层层的悬浮物,吸取时需要丢 ...

有答案了吗?
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