超速离心后，PBS洗多少次比较合适？

北燕南飞 · 发表于 2017-4-18 16:19:13

采用经典protocol方法（PBS清洗一次）对细胞培养液中外泌体进行提取时，电镜做出来背景非常脏
大家一般清洗几次，多次清洗会不会导致外泌体破裂？

北燕南飞 · 发表于 2017-4-18 17:01:36

本帖最后由北燕南飞于 2017-4-20 14:56 编辑

hzangs 发表于 2017-4-18 16:59
这个可能和细胞系本身有关，也跟你使用的染料有关。脏东西可能是染料里的。我是洗一次到两次一般一次 ...

有道理

北燕南飞 · 发表于 2017-4-24 14:54:54

八戒在五湖发表于 2017-4-23 10:01
楼主，我想问一下你提外泌体的protocol···

300g 10min，取上清；2,000g 10min，取上清； 10,000g 30min，取上清； 100,000g 70 min，取沉淀；加PBS清洗， 100,000g 70 min

北燕南飞 · 发表于 2017-5-15 20:53:58

弹珠1253 发表于 2017-5-10 21:42
小白请指教~请问下是否需要0.22 um微孔滤膜过滤呢？需要的话在第几步比较合适呢？ ...

我之前没有滤过，不过如果需要滤的话，应该在超离前

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