fbs去除exosomes

lenoch

超离FBS肯定不是稀释后超离的，可以梯度离心，先800G，增加至2000G，每次离心都是为了去除多余的杂志。最后上机100000G离心一晚上。第二天就可以收集exosome Free的FBS了。然并卵，我个人感觉这没什么用。
因为细胞在加了血清之后产生的exosome较饥饿时候要少，更要命的是如果你没有能够超离的机器，就只能依赖SBI的kit，这时候最麻烦的事情来了，上清中会有很多的蛋白。这些蛋白我可以保证是在饥饿状态下分泌很少的，但是一旦有血清状态下不知为啥总有很多蛋白，而且这些蛋白似乎不是来源于血清的。因为我尝试用Kit沉淀相同体积的血清，得到的蛋白沉淀微乎其微。life公司的技术人员认为这是细胞分泌的。他们就会和exosome夹杂在一起，被大量的沉淀下去。使用BCA定量你会欣喜的发现有很多很多…………结果真正的exosome只是夹杂在其中的很少的一点…………