ting.alina 发表于 2020-3-31 11:55:57

求细胞上清分离外泌体得率经验


细胞上清多少ml培液可以分离提取获得不低于5mg的外泌体。
下游实验一定需要不低于5mg的外泌体……
求大神解救,谢谢。

ting.alina 发表于 2020-3-31 11:57:19

急啊 在线等{:2_31:}

hermmoon 发表于 2020-4-3 14:54:15

不同细胞,不同提取方法,得率都不一样。建议先用50ml试试。

doctorzhw 发表于 2020-4-11 20:30:42

以我过去实验,间充质干细胞无血清条件培养基需要300-500ml。仅供参考!

Zpline 发表于 2020-4-26 15:41:31

看你用什么方法提取外泌体,沉淀法可能加上杂质能满足5mg,但如果是超离法得到的外泌体量是很少的。我们都是培养大量细胞收集上清,然后超离获取外泌体,最近做了1L多的细胞上清,也没有5mg的量。

Zpline 发表于 2020-4-26 15:42:02

另外,我很好奇你5mg的外泌体量是怎么定的?称重?

ting.alina 发表于 2020-5-22 13:56:32

Zpline 发表于 2020-4-26 15:42
另外,我很好奇你5mg的外泌体量是怎么定的?称重?

通过BCA 间接评估的哈 谢谢你的建议哈 确实需要很大量的上清啊

qfnucq 发表于 2020-6-23 08:24:08

ting.alina 发表于 2020-5-22 13:56
通过BCA 间接评估的哈 谢谢你的建议哈 确实需要很大量的上清啊

能不能用超微量分光光度计检测呀

zhangchao 发表于 2020-7-5 17:42:19

ting.alina 发表于 2020-5-22 13:56
通过BCA 间接评估的哈 谢谢你的建议哈 确实需要很大量的上清啊

你好方便加个微信么我也是做外泌体方向的 想请教一些问题 13844196076

ting.alina 发表于 2020-7-21 15:15:51

zhangchao 发表于 2020-7-5 17:42
你好方便加个微信么我也是做外泌体方向的 想请教一些问题 13844196076

已经加你哈,微信名称是Alina.
多交流切磋,比自己埋头苦干要有干劲~
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