超离提取血清外泌体的方法
想请教大家,超离提人血清外泌体,文献有说15万g过夜离心,也有1万g70min*2,有点蒙圈,请问大家具体怎么处理的呢??另外实验室条件有限,只有38.5ml大超离管离心不到2ml血清,是否会影响得率呢??谢谢!! 试试管子套管子,不保证安全!! 离心速度与你最后收获的“外泌体样品”纯度有关系。离心速度越大,收到的样品纯度越低。 另外血清可以考虑使用PBS稀释10~20倍然后再用38.5的管子去离心。一般10万g 70分钟 是可以的。 但是很难看到沉淀。 谢谢大神!!我最近用大管子离了一下,发现第一次超离后就有那种白的沉淀,晃动管子的时候也跟着飘起来了,这难道是杂质蛋白?用PBS洗之前是不是要把它们吸走呢? yunxinxu 发表于 2019-4-1 07:40试试管子套管子,不保证安全!!
哈哈这样的话实验室老师会把我轰出来 hzangs 发表于 2019-4-1 10:10
离心速度与你最后收获的“外泌体样品”纯度有关系。离心速度越大,收到的样品纯度越低。 另外血清可以考虑 ...
谢谢大神!!我最近用大管子离了一下,发现第一次超离后就有那种白的沉淀,晃动管子的时候也跟着飘起来了,这难道是杂质蛋白?用PBS洗之前是不是要把它们吸走呢?
hzangs 发表于 2019-4-1 10:10
离心速度与你最后收获的“外泌体样品”纯度有关系。离心速度越大,收到的样品纯度越低。 另外血清可以考虑 ...
请问大神,我也在做血清外泌体,可是感觉提取的外泌体纯度不好,现在用的10万转3h+2h,应该怎么办哇
anlinyuan 发表于 2019-4-17 17:11
谢谢大神!!我最近用大管子离了一下,发现第一次超离后就有那种白的沉淀,晃动管子的时候也跟着飘起来了, ...
你好,请问一下你这个问题解决了吗? xrhaha 发表于 2019-9-8 13:07
你好,请问一下你这个问题解决了吗?
PBS用滤膜滤一下就可以了 anlinyuan 发表于 2019-9-8 22:10
PBS用滤膜滤一下就可以了
感谢回复!时隔这么久,不知道你还在做外泌体吗?想请教一下是否离过MCF-7细胞的外泌体?我用100mL培基离心基本上看不到任何东西,这是正常现象吗?:'(还有外泌体直接用商用PBS重悬-80保存就行,还是要另外加东西让它稳定呀?