仙逆清水
发表于 2020-1-18 17:04:05
各位前辈好,有个外泌体LncRNA验证的问题想咨询一下,由于外泌体测序的时候用光了两个样本RNA,现在qPCR验证的时候就少了两个样本,请问这时候能用其他的样本替代吗
hzangs
发表于 2020-1-21 10:15:39
Mr-summerr 发表于 2020-1-16 14:42
hzangs老师你好,想请教下既然去年那篇文献Reassessment of Exosome Composition证明dsDNA是直接排到细胞外 ...
去年那篇文章只能说DNA可能不在囊泡中。如果你关注一下这个领域就会发现,前段时间 又出了一篇大文章。介绍 肿瘤来源的外泌体确实会有大约10%左右 携带有DNA。
hzangs
发表于 2020-1-21 10:16:47
仙逆清水 发表于 2020-1-18 17:04
各位前辈好,有个外泌体LncRNA验证的问题想咨询一下,由于外泌体测序的时候用光了两个样本RNA,现在qPCR验 ...
如果是细胞系的话还好。 再收一次外泌体,测qPCR 能部分说明问题。如果是人样本的话 那就不好办了
骑在银龙背上
发表于 2020-1-21 15:37:16
请问用qiagen的exoEasy试剂盒提取的外泌体直接共孵育好像因为XE洗脱液的问题对细胞有损伤,用什么办法能将外泌体置换到PBS中呢?
changlong
发表于 2020-2-1 17:27:06
冻存3-5年的血清样本提外泌体的效果怎么样呢,谢谢
hzangs
发表于 2020-2-2 08:17:59
骑在银龙背上 发表于 2020-1-21 15:37
请问用qiagen的exoEasy试剂盒提取的外泌体直接共孵育好像因为XE洗脱液的问题对细胞有损伤,用什么办法能将 ...
这个问 他们的技术人员。我们没有进行过相关尝试
hzangs
发表于 2020-2-2 08:18:27
changlong 发表于 2020-2-1 17:27
冻存3-5年的血清样本提外泌体的效果怎么样呢,谢谢
只要没反复冻融过, 基本不会有什么问题。
仙逆清水
发表于 2020-2-3 19:46:41
hzangs 发表于 2020-1-21 10:16
如果是细胞系的话还好。 再收一次外泌体,测qPCR 能部分说明问题。如果是人样本的话 那就不好办了 ...
老师 你好我用的是人类尿液样本,那两个样本用完后,现在只能用别的样本来代替,不知道这样行不行
hollychao
发表于 2020-6-9 20:44:41
请教hzangs大神~做ELISA测外泌体内的蛋白之前,是样本(外泌体悬浮液)和RIPA=1:1来裂解外泌体的吗的吗?裂解后需不需要离心取上清液呢?非常感谢~
hzangs
发表于 2020-6-11 15:24:56
hollychao 发表于 2020-6-9 20:44
请教hzangs大神~做ELISA测外泌体内的蛋白之前,是样本(外泌体悬浮液)和RIPA=1:1来裂解外泌体的吗的吗? ...
抱歉,这个真没做过。 但是按照你的描述来说, 没什么问题,你可以按照细胞质中蛋白的 ELISA 方法 来操作
。