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楼主: hzangs
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PEG聚沉+超速离心 试用报告 :Sci Rep文章技术重复

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 楼主| 发表于 2016-5-6 15:33:38 | 显示全部楼层
Siberia 发表于 2016-5-6 14:51
请问您超离的程序是啥?加速度多少,降速多少?
谢谢您!

最高加减速。  离心力100000~110000g
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 楼主| 发表于 2016-5-6 19:19:47 | 显示全部楼层
微泡biomarker 发表于 2016-5-6 16:30
能再问一下 你的抗体 是多少比例加的吗

1:3000~
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 楼主| 发表于 2016-5-8 15:52:46 | 显示全部楼层
淘芝夭夭 发表于 2016-5-8 15:43
你好 好像看到超离后的沉淀不是很明显啊

额    这个已经很明显了。  如果你用经典的超离方法,沉淀基本照片是看不到的
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 楼主| 发表于 2016-5-11 10:29:22 | 显示全部楼层

我不做MSC
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 楼主| 发表于 2016-5-12 18:39:09 | 显示全部楼层
woshiyywlly 发表于 2016-5-12 14:42
我按前面的步骤试了下,同时取相同体积的培液,用Life的exosome isolation kit 作为对照,离心后目测PEG提 ...

感谢分享   单看沉淀 好像意义不大。 毕竟 大部分都是杂蛋白。  还是要看洗一次 超离后的量了~
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 楼主| 发表于 2016-5-13 14:31:30 | 显示全部楼层
clavichord 发表于 2016-5-13 14:15
The next day, samples were
centrifuged in a tabletop centrifuge at maximum speed (Eppendorf, model 5 ...

是的。  我对他的这个描述 表示不信任。  所以 直接上10000g的
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 楼主| 发表于 2016-5-13 20:19:34 | 显示全部楼层
yulia 发表于 2016-5-13 17:47
版主,你使用的是哪个公司的PEG6000

生工生物
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 楼主| 发表于 2016-5-14 22:51:06 | 显示全部楼层
yulia 发表于 2016-5-14 15:20
版主,是先把血清超离去掉exosome,再配置含10%FBS的培基?还是配置好含10%FBS培基后,把培基超离?你用的 ...

前者~
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 楼主| 发表于 2016-5-18 14:08:59 | 显示全部楼层
陆峰彬 发表于 2016-5-18 14:05
版主你好,请问MSC外泌体分泌多?具体有多少?有提过的说100ml也就10ug,现在实验提取,不知道自己提的怎 ...

MSC 外泌体我没有做过具体的分离尝试。 但是因为周围有人做MSC的外泌体。 只是问过,说产量很可观。
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 楼主| 发表于 2016-5-19 13:11:20 | 显示全部楼层
jeff 发表于 2016-5-19 11:56
不洗可以吗?life的kit里面好像也没有洗。。。

最好还是洗洗    不然 杂蛋白太多了
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