PEG聚沉+超速离心试用报告：Sci Rep文章技术重复

hzangs · 发表于 2016-4-27 17:46:12

wxhljq 发表于 2016-4-27 17:19
你觉得这方法得到的杂蛋白多么？

PEG+超速离心清洗这个方法还可以。
如果你用一个十几毫升或者几十毫升PBS的体系进行清洗这一步的话，结果杂蛋白量应该会和超速离心差不多，甚至比超速离心效果好。如果你后面洗的这一步用小体系进行清洗的话可能杂蛋白会多一些。但总体讲要比单纯沉淀的方法好不少。

hzangs · 发表于 2016-4-28 12:44:04

子非鱼发表于 2016-4-28 11:24
斑竹，用来做细胞功能的exo是需要新鲜提的呢？还是也可以冻起来？我做了两次，都是把exo提出来放4度，等细 ...

这个我没有做过尝试

你可以试一试。

hzangs · 发表于 2016-4-29 23:22:21

子非鱼发表于 2016-4-29 22:43
那我也不尝试了。。。

hzangs · 发表于 2016-5-2 12:26:08

思想滚得远发表于 2016-5-2 11:55
请问是无血清培养基提的Exosome么，还是去exosome血清培养基提取的exosome，我用MSC无血清培养基并不能看 ...

我使用的是去除exosome的血清。

hzangs · 发表于 2016-5-2 13:26:14

思想滚得远发表于 2016-5-2 13:09
是SBI的那种去exosome血清么还是自己超离去除的exosome

自己超离去除的

hzangs · 发表于 2016-5-4 14:52:10

yayinano 发表于 2016-5-4 13:48
群主，你好，最近使用了你给出来的protocol，我用的是病人抽出来的血清（本人医生），1ml血清，加了1ml的PE ...

你还是需要参考一下原文的。只是我根据之前的一篇文献提供的方法做的。你要读一下原文看看他们是怎么做的。我发这个帖子主要目的就是验证一下他们方法的可行性，没有再做更多的尝试。

hzangs · 发表于 2016-5-5 17:59:28

微泡biomarker 发表于 2016-5-5 14:36
请问一下楼主的WB的最小上样量是多少微克呢？

这个很难说。几个微克肯定是够的

hzangs · 发表于 2016-5-6 09:34:29

微泡biomarker 发表于 2016-5-6 09:12
那问一下楼主，你的WB的上样量是多少啊

一般最少5个微克

hzangs · 发表于 2016-5-6 09:35:26

5五吾发表于 2016-5-4 21:18
请问用0.22um的filter可以吗？

额这个要试过才知道

hzangs · 发表于 2016-5-6 10:39:58

微泡biomarker 发表于 2016-5-6 10:28
那问一下您是干转还是湿转呢

湿转。
很多时候，WB的决定因素是抗体… 抗体够好的话一点点蛋白就够了

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