外泌体之家 | 细胞外膜泡领域核心平台—exosomes & microvesicles—小膜泡大作用

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楼主: hzangs
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PEG聚沉+超速离心 试用报告 :Sci Rep文章技术重复

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发表于 2016-5-13 14:15:56 | 只看该作者
The next day, samples were
centrifuged in a tabletop centrifuge at maximum speed (Eppendorf, model 5810 R using an S-4-104 swing bucket
rotor; 3,214 g) for 1 hour at 4 °C.文中用的是3214g,您用的是10000g?
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 楼主| 发表于 2016-5-13 14:31:30 | 只看该作者
clavichord 发表于 2016-5-13 14:15
The next day, samples were
centrifuged in a tabletop centrifuge at maximum speed (Eppendorf, model 5 ...

是的。  我对他的这个描述 表示不信任。  所以 直接上10000g的
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发表于 2016-5-13 16:06:22 | 只看该作者
lz有没有做过前列腺癌的细胞,它们外泌体分泌多吗
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发表于 2016-5-13 16:30:38 | 只看该作者
没有超速离心机,作者给的8%PEG+washing法的洗涤PEG这步没法做。有没人试过用8%PEG+5%PEG法呢?我看作者给的图中显示这种方法没有PEG+超离washing效果好,但好像比试剂盒效果好。
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发表于 2016-5-13 16:59:00 | 只看该作者
hzangs 发表于 2016-5-2 12:26
我使用的是 去除exosome的血清。

怎么去掉exosome?有专门无exosome的血清卖吗?
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发表于 2016-5-13 17:01:21 | 只看该作者
hzangs 发表于 2016-5-2 13:26
自己超离去除的

版主,是先把血清超离去掉exosome,再配置含10%FBS的培基?还是配置好含10%FBS培基后,把培基超离?你用的哪种方式?
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发表于 2016-5-13 17:09:18 | 只看该作者
lenoch 发表于 2016-5-11 12:49
我用的是0.22的,个人感觉会使exosome更纯一些,至少220nm以上的都滤掉了。会使你的电镜和nanosight更好 ...

说得有道理
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发表于 2016-5-13 17:13:05 | 只看该作者
把帖子挨篇都看完了,谢谢楼主的倾情分享
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发表于 2016-5-13 17:47:27 | 只看该作者
版主,你使用的是哪个公司的PEG6000
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 楼主| 发表于 2016-5-13 20:19:34 | 只看该作者
yulia 发表于 2016-5-13 17:47
版主,你使用的是哪个公司的PEG6000

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