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楼主: hzangs
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PEG聚沉+超速离心 试用报告 :Sci Rep文章技术重复

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发表于 2016-4-27 17:19:51 | 只看该作者
本帖最后由 hzangs 于 2016-4-27 17:44 编辑

你觉得这方法得到的杂蛋白多么?
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 楼主| 发表于 2016-4-27 17:46:12 | 只看该作者
wxhljq 发表于 2016-4-27 17:19
你觉得这方法得到的杂蛋白多么?

PEG+超速离心清洗  这个方法还可以。
如果你用一个十几毫升或者几十毫升PBS的体系进行清洗这一步的话,结果杂蛋白量应该会和超速离心差不多,甚至比超速离心效果好。  如果你后面洗的这一步 用小体系进行清洗的话  可能杂蛋白会多一些。 但总体讲 要比单纯沉淀的方法 好不少。
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发表于 2016-4-27 23:28:24 | 只看该作者
本帖最后由 Jimson 于 2016-4-27 23:43 编辑

如果有电镜结果就完美了。顶顶顶
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发表于 2016-4-28 11:24:38 | 只看该作者
斑竹,用来做细胞功能的exo是需要新鲜提的呢?还是也可以冻起来?我做了两次,都是把exo提出来放4度,等细胞准备好了,再对细胞处理,但是因为有的时候不凑巧,而exo又不能在4度存放超过一周。看文献总是说提取exo后-80度保存备用,不知道这个适用于功能试验吗
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 楼主| 发表于 2016-4-28 12:44:04 | 只看该作者
子非鱼 发表于 2016-4-28 11:24
斑竹,用来做细胞功能的exo是需要新鲜提的呢?还是也可以冻起来?我做了两次,都是把exo提出来放4度,等细 ...

这个 我没有做过尝试   你可以试一试。
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发表于 2016-4-29 22:43:30 | 只看该作者
hzangs 发表于 2016-4-28 12:44
这个 我没有做过尝试   你可以试一试。

那我也不尝试了。。。
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 楼主| 发表于 2016-4-29 23:22:21 | 只看该作者
子非鱼 发表于 2016-4-29 22:43
那我也不尝试了。。。

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发表于 2016-5-2 11:55:34 | 只看该作者
hzangs 发表于 2016-4-27 16:54
你用  DC细胞  或者MSC  或者 胰腺癌细胞 就知道了   那产量,简直是细胞把自己粉碎了 然后往外吐 ex ...

请问是无血清培养基提的Exosome么,还是去exosome血清培养基提取的exosome,我用MSC无血清培养基并不能看到大量沉淀
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 楼主| 发表于 2016-5-2 12:26:08 | 只看该作者
思想滚得远 发表于 2016-5-2 11:55
请问是无血清培养基提的Exosome么,还是去exosome血清培养基提取的exosome,我用MSC无血清培养基并不能看 ...

我使用的是 去除exosome的血清。
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发表于 2016-5-2 13:09:20 | 只看该作者
hzangs 发表于 2016-5-2 12:26
我使用的是 去除exosome的血清。

是SBI的那种去exosome血清么 还是自己超离去除的exosome
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