PEG聚沉+超速离心 试用报告 ：Sci Rep文章技术重复

hzangs

liwx 发表于 2018-3-28 01:15
如果是10000g过后，用10000g的转速PBS洗涤，这种方法是否也可以去除杂蛋白？

只能去除部分杂蛋白。  目前没有任何办法完全去除外泌体样品中的杂蛋白。只能是尽可能减少

tianjing0312

楼主，您好，我是用超高速离心的方法，300g 10‘ 1200g 20’ 10000g 30‘ 然后 110000g 90’，但是110000g离心完并没有看到任何沉淀。用的NSC神经干细胞，两个离心管共28毫升。请问这个是怎么回事呢？
还有就是最后还是用pbs重悬了管底（共100ulpbs），那么直接加入5xloading buffer 煮沸上样就可以了吗？如果测浓度的话应该怎么测呢？培养基的浅红色会不会影响BCA定量的吸光值呢？
谢谢您

805580262

您好请问如果提取血浆外泌体的话，得率怎么呢？

huangsheng

hzangs 发表于 2016-5-2 13:26
自己超离去除的

版主，自己超离的话，一般多长时间，之前看您的专栏，是需要14-16个小时，我这边仪器原因，只能离4个小时，可以吗？

hzangs

huangsheng 发表于 2018-12-19 11:17
版主，自己超离的话，一般多长时间，之前看您的专栏，是需要14-16个小时，我这边仪器原因，只能离4个小时 ...

4h 应该是不太可行的。。。

桃花灼灼

本人刚开始做外泌体，请问一下楼里的大神们，细胞在6孔板里长了五天了，第三天的时候密度已经有90%了，还能处理，然后收集细胞上清液吗？会不会细胞老化了，分泌外泌体就少了啊

hzangs

桃花灼灼 发表于 2019-1-14 09:12
本人刚开始做外泌体，请问一下楼里的大神们，细胞在6孔板里长了五天了，第三天的时候密度已经有90%了，还能 ...

6孔板收集培液还想做外泌体 o(╯□╰)o     大家一般是10cm 盘子   五六盘起

桃花灼灼

hzangs 发表于 2019-1-15 14:38
6孔板收集培液还想做外泌体 o(╯□╰)o     大家一般是10cm 盘子   五六盘起

前面想先做电镜，看了一下好像电镜需要的量不是很多

hzangs

桃花灼灼 发表于 2019-1-15 16:41
前面想先做电镜，看了一下好像电镜需要的量不是很多

NTA用量不大。 但是电镜用量可不小。  如果起始体积小了， 电镜下找不到结构。

桃花灼灼

hzangs 发表于 2019-1-17 19:05
NTA用量不大。 但是电镜用量可不小。  如果起始体积小了， 电镜下找不到结构。 ...

恩恩好的，本来是打算先送样去做NTA，再做电镜的，我是用的试剂盒提外泌体，50ml细胞上清提的外泌体去做NTA可以吗