PEG聚沉+超速离心 试用报告 ：Sci Rep文章技术重复

wjy

hzangs 发表于 2016-4-26 21:19
是的。  cell1 超离分离的时候出了点问题，没有收到……

ALIX是CST的  CD63 来自proteintech.  ...

刚查了一下是cell signaling 的2171 ALIX（3A9）鼠单抗吗？

hzangs

wjy 发表于 2016-4-26 23:00
可以不可告诉我具体货号那？感觉你的wb图做的棒棒哒哈。想买你的抗体试一试哈～你用过TSG101和CD9的抗体 ...

ALIX #2171（CST）
CD63 #25682-1-AP （proteintech）
TSG101 #ab133586 （abcam）
这三只抗体的效果都很好。 你可以尝试。 我一直用的都是这三个。
CD9 没有用过。  希望这些东西对你有所帮助

hzangs

yueyujiaexo 发表于 2016-4-26 23:00
你好，你的第一次离心就用的10000g, 有没有试过文献里的3000g呢？ 谢谢。 我们实验室的离心机达不到10000g, ...

第一次 3000g 我还真没有尝试过。
只要有沉淀，基本里面就有外泌体的~

wjy

hzangs 发表于 2016-4-26 23:11
ALIX #2171（CST）
CD63 #25682-1-AP （proteintech）
TSG101 #ab133586 （abcam）

非常的感谢 你哈 莫名的崇拜哈

hzangs

wjy 发表于 2016-4-26 23:13
非常的感谢 你哈 莫名的崇拜哈

论坛嘛， 就是大家相互讨论，相互帮助的地方。不用谢~

Bridgen桥生物

hzangs 发表于 2016-4-26 23:15
论坛嘛， 就是大家相互讨论，相互帮助的地方。不用谢~

很不错的呀，这么给我们分享，给力呀。

pengqiao0605

请问楼主收集这些沉淀用了多少的细胞上清？

hzangs

pengqiao0605 发表于 2016-4-27 14:49
请问楼主收集这些沉淀用了多少的细胞上清？

这是一个外泌体释放量十分大的细胞。  收集这些外泌体 大概用了7ml 培液

pengqiao0605

哇塞，你用的这细胞可真够给力的。我用的是T淋巴细胞系100ml上清也就做了个电镜。

hzangs

pengqiao0605 发表于 2016-4-27 16:10
哇塞，你用的这细胞可真够给力的。我用的是T淋巴细胞系100ml上清也就做了个电镜。 ...

你用 巨噬细胞  或者 胰腺癌细胞 就知道了   那产量，简直是细胞把自己粉碎了 然后往外吐 exosome啊！
可能分泌旺盛的细胞  外泌体释放量会比较高。