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楼主: 宋梦阳
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PKH67染色

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发表于 2016-5-19 01:41:18 | 只看该作者
惜名 发表于 2015-12-18 08:44
这个要自己摸索浓度了。我做过6和12孔板,一般加30-100ul都可以获得满意结果。但是,也要根据你获得exo的 ...

问题又来了,几个细胞共培养的时候怎么保证加入的外泌体量都一致呢?是不是加之前,外泌体都需要做一个BCA定量啊。
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发表于 2016-5-19 01:58:43 | 只看该作者
宋梦阳 发表于 2016-2-26 11:42
好久没登陆了,已发送,请查收

能否发我一份PKH67染色步骤,非常感谢 1527109313@qq.com
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发表于 2016-6-4 08:45:15 | 只看该作者
宋梦阳 发表于 2015-10-16 15:37
EXO染色步骤,已发

能发给我一份吗 569232516@qq.com
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发表于 2016-6-12 10:21:47 | 只看该作者
宋梦阳 发表于 2015-10-13 11:19
我发现我现在是加了1ul的PKH67与750ul的Diluent C混合,然后EXO与250ul Diluent Ca混合,这样很节省,效果 ...

您好,请问能否发我一份用PKH26染外泌体的的protocol,我试着按别人的方法染过,发现洗涤外泌体时,100000g离心的话,多余的染料也会沉降下来,根本无法去除,不知道您是怎么去除多余的染料的。
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发表于 2016-6-12 10:24:21 | 只看该作者
宋梦阳 发表于 2015-10-13 11:17
我发现我现在是加了1ul的PKH67与750ul的Diluent C混合,然后EXO与250ul Diluent Ca混合,这样很节省,效 ...

您好,请问能否发我一份用PKH26染外泌体的的protocol,我试着按别人的方法染过,发现洗涤外泌体时,100000g离心的话,多余的染料也会沉降下来,根本无法去除,不知道您是怎么去除多余的染料的。641505532@qq.com
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发表于 2016-6-12 10:53:22 | 只看该作者
qyhhzyh 发表于 2016-6-12 10:21
您好,请问能否发我一份用PKH26染外泌体的的protocol,我试着按别人的方法染过,发现洗涤外泌体时,10000 ...

我的也是,我是用PKH67 染色,多余的染料也会超离沉降下来
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发表于 2016-6-12 10:57:20 | 只看该作者
cherry 发表于 2016-6-12 10:53
我的也是,我是用PKH67 染色,多余的染料也会超离沉降下来

而且我用空白的PBS做对照,也加入了染料,结果去侵染细胞时,细胞也被染上了色。另外请问一下,你加入标记的外泌体多长时间去观察的?
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发表于 2016-6-12 13:25:06 | 只看该作者
qyhhzyh 发表于 2016-6-12 10:57
而且我用空白的PBS做对照,也加入了染料,结果去侵染细胞时,细胞也被染上了色。另外请问一下,你加入标 ...

你用BSA 终止染色反应没有? 我是加入exosome 24h 观察的
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发表于 2016-6-12 13:31:07 | 只看该作者
cherry 发表于 2016-6-12 13:25
你用BSA 终止染色反应没有? 我是加入exosome 24h 观察的

嗯,加入BSA终止反应了。终止反应后PKH26是不是就不应该再起作用了?
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发表于 2016-6-18 15:46:26 | 只看该作者
宋梦阳 发表于 2015-10-13 11:19
我发现我现在是加了1ul的PKH67与750ul的Diluent C混合,然后EXO与250ul Diluent Ca混合,这样很节省,效果 ...

能否发我一份PKH67染色步骤,非常感谢 qwiuei@163.com
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