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咨询NTA图的问题。

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发表于 2019-7-1 20:41:26 | 显示全部楼层
hzangs 发表于 2019-3-25 10:41
是测试仪器  自动生成的。   一般论文里 不是用你这样的图。  你可以down几篇论文看看 ...

想请教前辈一个问题:最近做了两次NTA,两批细胞,同样的干预办法,同样用超离提取exo,分别找了两家公司来做,看到50-150nm粒径的粒子浓度都是10^7个/ml(稀释后),但涉及到具体粒子数时,一个是处理1明显少于处理2,一个是处理1略多于处理2,请问这正常吗?我的师姐做出的是处理1明显少于处理2的。超离时我都非常小心,唯一不同的是:第一次超离在重悬前我是直接倒掉上清,第二次是移液枪吸取上清、1ml枪头洗掉最后一点液体,再重悬。我们组此前都是按照第一个办法做的,但我看论坛里前辈们是用吸的。所以我现在也很纠结。在考虑要不要再重复一次NTA,但是太贵了。不知道有没有前辈做过exo在不同条件下释放量的改变,或者有其他的建议。不甚感激!!
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沙发
发表于 2019-7-1 21:36:10 | 显示全部楼层
我请电镜老师检测过同一批样本,鉴定是外泌体,且看出来杂质不多。同时我之前做过外泌体的WB检测cd63和cd81,但每次趋势好像不太一样。
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发表于 2019-7-2 17:30:27 | 显示全部楼层
hzangs 发表于 2019-7-2 09:34
NTA 除非你要用粒子数目定量,不然不用反复做。 证明你的分离方法没问题 就行了。   别说找两个公司测,  ...

谢谢前辈!所以多余对于exo释放量的测定上,还是建议WB鉴定标志蛋白为主吗?谢谢!
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