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又是我,外泌体小白超离血清的电镜图

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楼主
发表于 2018-4-24 20:35:04 | 显示全部楼层 回帖奖励 |倒序浏览 |阅读模式
感谢各位战友关注,请各位帮忙看一下小白我最近做的电镜图是不是外泌体呢?感谢!

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沙发
 楼主| 发表于 2018-4-24 22:29:20 | 显示全部楼层
hzangs 发表于 2018-4-24 22:20
可以凑合用了。    背景杂蛋白太多了

感谢大神回复,我这次是用超离的方法的。请问有什么办法可以进一步去掉杂蛋白呢??谢谢
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板凳
 楼主| 发表于 2018-4-24 22:37:44 | 显示全部楼层

我们单位暂时没条件做这个
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 楼主| 发表于 2018-4-24 22:40:45 | 显示全部楼层
songzizhu 发表于 2018-4-24 22:37
请问楼主,超离之后送电镜之前,样品怎么处理的呢?用的什么buffer,还是需要fix。我的做出来都是怪怪的。 ...

你好,感谢回复。我是用PBS重悬的,然后4度冰箱保存,在两天内送去做电镜的。
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 楼主| 发表于 2018-5-2 15:00:47 | 显示全部楼层
程琳 发表于 2018-5-2 13:13
请问楼主超离血清的步骤是怎样的,我最近也在尝试从血清里提外泌体,试过1ml血清,PBS稀释2000g30min,20000 ...

你好,感谢回复。我是按照论坛里分享的2006年的那篇protocol来做的。
http://www.exosome.com.cn/forum. ... amp;_dsign=7cdb659a
祝好
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 楼主| 发表于 2018-5-9 11:43:30 | 显示全部楼层
15122392869 发表于 2018-5-8 14:41
请问 收集了多少细胞上清呢?

你好,感谢关注。我是做血清的呢
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 楼主| 发表于 2019-9-16 14:34:06 | 显示全部楼层
hua2018 发表于 2019-9-16 14:15
楼主用的多少血清提取的外泌体,最后用多少PBS重悬的呢?样本送样前和运输过程中有没有-80度冻存? ...

你好啊,我用的4毫升的血清提取的外泌体的。最后用的80微升左右的PBS重悬的。我们单位自己有电镜,所以做完就上机看了,没有冻存的。
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