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标题: 每一个外泌体样本都需要做电镜、WB检测验证吗？ [打印本页]
作者: ssydll    时间: 2016-5-16 10:55
标题: 每一个外泌体样本都需要做电镜、WB检测验证吗？
大家好，我是新手，请各位支个招，每个样本都需要用电镜和WB同时验证出来才能行吗？谢谢！
作者: ssydll    时间: 2016-5-16 10:57
如果只做nanosight检测可以说明问题吗？
作者: hzangs    时间: 2016-5-16 14:38
一般来说，如果你使用的是细胞系，只需要把试验中涉及的每一个细胞系 做一次电镜一次WB一次粒径分析 来证明你的分离方法是可以拿到这些细胞系分泌的外泌体的 即可。
如果你是用的是血清，类似的 你需要把实验组和对照组的血清  取1-2例秀一下，证明你的方法可以拿到这些血清里的外泌体即可。
之后再做的时候 不需要每次都验证。
作者: ssydll    时间: 2016-5-16 16:15
hzangs 发表于 2016-5-16 14:38
一般来说，如果你使用的是细胞系，只需要把试验中涉及的每一个细胞系 做一次电镜一次WB一次粒径分析 来证明 ...

好的，谢谢，太好了，以后多向您请教
作者: ssydll    时间: 2016-5-16 16:19
hzangs 发表于 2016-5-16 14:38
一般来说，如果你使用的是细胞系，只需要把试验中涉及的每一个细胞系 做一次电镜一次WB一次粒径分析 来证明 ...

多亏有外泌体之家还有不吝指教的各位大神，我们这种新手才能慢慢成长起来。
作者: hzangs    时间: 2016-5-16 16:57
ssydll 发表于 2016-5-16 16:19
多亏有外泌体之家还有不吝指教的各位大神，我们这种新手才能慢慢成长起来。 ...

过奖了   大家相互帮助~相互学习~
作者: arrowleeincmu    时间: 2016-6-12 16:02
hzangs 发表于 2016-5-16 14:38
一般来说，如果你使用的是细胞系，只需要把试验中涉及的每一个细胞系 做一次电镜一次WB一次粒径分析 来证明 ...

hzangs老师，我想问一下您说的粒径分析具体指哪种检测方法呀？是DLS吗？
作者: hzangs    时间: 2016-6-12 17:39
arrowleeincmu 发表于 2016-6-12 16:02
hzangs老师，我想问一下您说的粒径分析具体指哪种检测方法呀？是DLS吗？

NTA 等
作者: sonja_forever    时间: 2016-8-26 19:41
hzangs 发表于 2016-6-12 17:39
NTA 等

请问用电镜+粒径分析+流式验证可以吗？标志蛋白做CD9和CD63的流式。
流式可以代替WB吗？可以说明问题吗？
作者: hzangs    时间: 2016-8-28 12:19
sonja_forever 发表于 2016-8-26 19:41
请问用电镜+粒径分析+流式验证可以吗？标志蛋白做CD9和CD63的流式。
流式可以代替WB吗？可以说明问题吗？ ...

基本可以说明问题。  但是paper里大家还是习惯于使用WB，因为这个方法简单没有必要使用流式
作者: sonja_forever    时间: 2016-9-9 10:08
我觉得流式比较简单……
作者: dancing    时间: 2016-11-8 14:57
hzangs 发表于 2016-8-28 12:19
基本可以说明问题。  但是paper里大家还是习惯于使用WB，因为这个方法简单没有必要使用流式 ...

哪家公司可以测nanosight啊，找不到地方测
作者: hzangs    时间: 2016-11-8 15:53
dancing 发表于 2016-11-8 14:57
哪家公司可以测nanosight啊，找不到地方测

不知道   你再问问别人，  我只听说 上海这边有两三个大学有机器。
作者: dancing    时间: 2016-11-8 16:58
hzangs 发表于 2016-11-8 15:53
不知道   你再问问别人，  我只听说 上海这边有两三个大学有机器。

要是做不了nanosight，用nanoZS代替可以吗
作者: hzangs    时间: 2016-11-8 19:14
dancing 发表于 2016-11-8 16:58
要是做不了nanosight，用nanoZS代替可以吗

好像有看到过paper 用ZS的
作者: dancing    时间: 2016-11-9 09:18
hzangs 发表于 2016-11-8 19:14
好像有看到过paper 用ZS的

谢谢，因为zs不能测浓度，需要单独测个浓度吗
作者: cneagle66    时间: 2017-4-15 18:53
流式所需标本量应该比WB少吧，感觉流式更敏感一些
作者: JKF    时间: 2018-1-31 16:20
sonja_forever 发表于 2016-9-9 10:08
我觉得流式比较简单……

请问有流式步骤吗？急求



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