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标题: 新手小白，想咨询怎样获得无外泌体血清 [打印本页]
作者: 加油干！    时间: 2022-5-12 22:45
标题: 新手小白，想咨询怎样获得无外泌体血清
本帖最后由 加油干！ 于 2022-5-13 19:38 编辑

细胞实验想用无外泌体的血清，但买的话太贵了，想自己离心，实验室有贝克曼的超速离心机，之前尝试过2000g30min,取上清，12000g45min取上清，110000g70min离心三次取上清，获得无外泌体血清，不知道这样可不可以（我也忘记在哪看的了，我再去找找）。我看很多都要过夜，但超离我也是刚开始操作，不敢过夜。并且问一下怎么去检测我的血清里没有外泌体了啊
作者: smuxf    时间: 2022-5-15 19:20
起码得11wg10小时以上，我的经验
作者: 加油干！    时间: 2022-5-16 22:07
smuxf 发表于 2022-5-15 19:20
起码得11wg10小时以上，我的经验

请问您有去验证过超离后的血清中是否还有外泌体吗？
作者: 王姝月    时间: 2022-5-27 20:21
无外泌体血清制备步骤：

　　1. 根据需要处理的血清体积选择合适的转子与超离管。

　　2. 在超净工作台，将普通血清置于超离管中，配平后，进行热封口。

　　3. 将封口后的超离管放于离心机转子中，并加入相应适配器然后拧紧转头盖。

　　4. 设置离心程序：4℃，120,000 ×g，离心18小时（也有研究者选择100,000 ×g离心18小时【2】）。

　　5. 离心结束后，回收上清液，为避免污染，在超净工作台操作。

　　6. 收集得到无外泌体血清，并储存于-20℃中备用。

　　无外泌体血清产品特点：

　　1、专为外泌体研究而设计；

　　2、无菌采集的健康胎牛血清过滤法去除外泌体；

　　3、胎牛血清内源外泌体去除率达97%；

　　4、过滤法可有效保护FBS中重要的细胞营养因子；

　　5、培养的细胞生长速率与形态与普通FBS无差异。
作者: 王姝月    时间: 2022-5-27 20:23
王姝月 发表于 2022-5-27 20:21
无外泌体血清制备步骤：

　　1. 根据需要处理的血清体积选择合适的转子与超离管。

您也可以看下我们的外泌体专业培养基http://www.umibio.cn/product/278142104这是网址联系方式：13439782094
作者: 加油干！    时间: 2022-5-27 22:13
王姝月 发表于 2022-5-27 20:23
您也可以看下我们的外泌体专业培养基http://www.umibio.cn/product/278142104这是网址联系方式：13439782 ...

感谢感谢
作者: ZCJG    时间: 2022-8-21 15:40
突然有个想法 既然-80反复冻融会破坏提出来的成品外泌体 那反复冻融配制好的培养基是否可以去除培养基中的外泌体？
作者: Polish    时间: 2023-5-9 11:10
ZCJG 发表于 2022-8-21 15:40
突然有个想法 既然-80反复冻融会破坏提出来的成品外泌体 那反复冻融配制好的培养基是否可以去除培养基中的 ...

破坏不等于全部消除
作者: 761628900    时间: 2023-9-18 20:45
想问下楼主最后是采取的什么条件，我们这里超速离心不具备过夜条件，我想配成20%FBS在去超速离心，就是也不知道这个20%FBS要离心多久
作者: amelinda    时间: 2023-10-6 15:01
细胞实验想用无外泌体的血清，但买的话太贵了，想自己离心，热点八卦趣事
发现北京-品味生活实验室有贝克曼的超速离心机，之前尝试过2000g30min,取上清，车辆世界
澳洲生活12000g45min取上清，110000g70min离心三次取上清，获得无外泌体血清，不知道这样可不可以（我也忘记在哪看的了，我再去找找）。我看很多都要过夜，双色球走势图
澳洲幸运20但超离我也是刚开始操作，不敢过夜。并且问一下怎么去检测我的血清里没有外泌体了啊




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