PEG聚沉+超速离心试用报告：Sci Rep文章技术重复

子非鱼 · 发表于 2016-4-29 22:43:30

hzangs 发表于 2016-4-28 12:44
这个我没有做过尝试你可以试一试。

那我也不尝试了。。。

hzangs · 发表于 2016-4-28 12:44:04

子非鱼发表于 2016-4-28 11:24
斑竹，用来做细胞功能的exo是需要新鲜提的呢？还是也可以冻起来？我做了两次，都是把exo提出来放4度，等细 ...

这个我没有做过尝试

你可以试一试。

子非鱼 · 发表于 2016-4-28 11:24:38

斑竹，用来做细胞功能的exo是需要新鲜提的呢？还是也可以冻起来？我做了两次，都是把exo提出来放4度，等细胞准备好了，再对细胞处理，但是因为有的时候不凑巧，而exo又不能在4度存放超过一周。看文献总是说提取exo后-80度保存备用，不知道这个适用于功能试验吗

Jimson · 发表于 2016-4-27 23:28:24

本帖最后由 Jimson 于 2016-4-27 23:43 编辑

如果有电镜结果就完美了。顶顶顶

hzangs · 发表于 2016-4-27 17:46:12

wxhljq 发表于 2016-4-27 17:19
你觉得这方法得到的杂蛋白多么？

PEG+超速离心清洗这个方法还可以。
如果你用一个十几毫升或者几十毫升PBS的体系进行清洗这一步的话，结果杂蛋白量应该会和超速离心差不多，甚至比超速离心效果好。如果你后面洗的这一步用小体系进行清洗的话可能杂蛋白会多一些。但总体讲要比单纯沉淀的方法好不少。

wxhljq · 发表于 2016-4-27 17:19:51

本帖最后由 hzangs 于 2016-4-27 17:44 编辑

你觉得这方法得到的杂蛋白多么？

hzangs · 发表于 2016-4-27 16:54:17

本帖最后由 hzangs 于 2016-5-18 14:10 编辑

pengqiao0605 发表于 2016-4-27 16:10
哇塞，你用的这细胞可真够给力的。我用的是T淋巴细胞系100ml上清也就做了个电镜。 ...

你用巨噬细胞或者胰腺癌细胞就知道了

那产量，简直是细胞把自己粉碎了然后往外吐 exosome啊！
可能分泌旺盛的细胞外泌体释放量会比较高。

pengqiao0605 · 发表于 2016-4-27 16:10:26

哇塞，你用的这细胞可真够给力的。我用的是T淋巴细胞系100ml上清也就做了个电镜。

hzangs · 发表于 2016-4-27 16:01:52

pengqiao0605 发表于 2016-4-27 14:49
请问楼主收集这些沉淀用了多少的细胞上清？

这是一个外泌体释放量十分大的细胞。收集这些外泌体大概用了7ml 培液

pengqiao0605 · 发表于 2016-4-27 14:49:56

请问楼主收集这些沉淀用了多少的细胞上清？

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